[發明專利]轉化破囊壺菌目微生物的產物和方法

有效

• 申請號: 200910141898.3
• 申請日: 2002-04-16
• 公開（公告）號: CN101760469A
• 公開（公告）日: 2010-06-30
• 發明（設計）人: 保羅·G·羅斯勒;T·戴夫·馬修斯;湯姆·M·拉姆西爾;詹姆斯·G·梅茨
• 申請（專利權）人: 馬泰克生物科學公司
• 主分類號: C12N15/60
• 分類號: C12N15/60;C12N1/15;C12N15/80;C12N15/87;C12N15/88;C12N15/89;C12N15/11;C12R1/645
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 閔丹

1.分離的核酸分子，包含選自下列的核酸序列：

a.編碼下述蛋白的核酸序列，該蛋白具有選自SEQ?ID?NO：15，SEQ?IDNO：19，SEQ?ID?NO：22或SEQ?ID?NO：24的氨基酸序列，其中所述蛋白為乙酰乳酸合酶；

b.編碼下述蛋白的核酸序列，該蛋白具有與氨基酸序列(a)至少約75％相同的氨基酸序列，其中所述蛋白為乙酰乳酸合酶；和，

c.與核酸序列(a)或(b)完全互補的核酸序列。

2.權利要求1的分離的核酸分子，其中所述核酸序列編碼具有與氨基酸序列(a)至少約85％相同的氨基酸序列的蛋白，并且其中所述蛋白為乙酰乳酸合酶。

3.權利要求1的分離的核酸分子，其中所述核酸序列編碼具有與氨基酸序列(a)至少約95％相同的氨基酸序列的蛋白，并且其中所述蛋白為乙酰乳酸合酶。

4.權利要求1的分離的核酸分子，其中所述核酸序列編碼具有與SEQID?NO：15不同的氨基酸序列的蛋白，該不同是由于在選自116G，117A，192P，200A，251K，358M，383D，592V，595W或599F的氨基酸位置發生氨基酸缺失，插入或取代。

5.權利要求1的分離的核酸分子，其中所述核酸序列編碼一種蛋白，該蛋白具有選自SEQ?ID?NO：15，SEQ?ID?NO：19，SEQ?ID?NO：22或SEQ?IDNO：24的氨基酸序列，并且其中所述蛋白為乙酰乳酸合酶。

6.權利要求1的分離的核酸分子，其中所述核酸序列選自SEQ?ID?NO：14的核苷酸1260-3314，SEQ?ID?NO：18的核苷酸1260-3314，SEQ?ID?NO：21的核苷酸1260-3314或SEQ?ID?NO：23的核苷酸1260-3314。

7.權利要求1的分離的核酸分子，其中蛋白(a)或(b)的表達賦予用所述核酸分子轉化的破囊壺菌目微生物對選自如下的化合物降低的敏感性：磺酰脲化合物，咪唑啉酮類抑制劑，或嘧啶基羥苯甲酸鹽。

8.權利要求7的分離的核酸分子，其中所述核酸序列編碼具有選自SEQID?NO：19，SEQ?ID?NO：22或SEQ?ID?NO：24的氨基酸序列的蛋白。

9.權利要求7的分離的核酸分子，其中所述核酸序列選自SEQ?ID?NO：14的核苷酸1260-3314，SEQ?ID?NO：18的核苷酸1260-3314，SEQ?ID?NO：21的核苷酸1260-3314或SEQ?ID?NO：23的核苷酸1260-3314。

10.權利要求1的分離的核酸分子，其中所述核酸序列編碼Schizochytrium乙酰乳酸合酶。

11.權利要求10的分離的核酸分子，其中所述Schizochytrium乙酰乳酸合酶的表達賦予用所述核酸分子轉化的破囊壺菌目微生物對選自如下的化合物降低的敏感性：磺酰脲化合物，咪唑啉酮類抑制劑，或嘧啶基羥苯甲酸鹽。

12.重組核酸分子，包含與轉錄控制序列可操作性連接的權利要求1的分離的核酸分子。

13.用權利要求12所述重組核酸分子轉化的破囊壺菌目的重組微生物。

14.用于轉化破囊壺菌目微生物的重組載體，包含編碼乙酰乳酸合酶的核酸序列，該乙酰乳酸合酶賦予破囊壺菌目微生物對選自如下的化合物降低的敏感性：磺酰脲化合物，咪唑啉酮類抑制劑，或嘧啶基羥苯甲酸鹽，其中所述乙酰乳酸合酶具有選自如下的氨基酸序列：

a.選自SEQ?ID?NO：19，SEQ?ID?NO：22或SEQ?ID?NO：24的氨基酸序列；和，

b.與氨基酸序列(a)至少約75％相同的氨基酸序列；

其中所述編碼乙酰乳酸合酶的核酸序列與轉錄控制序列可操作性連接。

15.權利要求14的重組載體，其中所述重組載體是表達載體。

16.權利要求14的重組載體，其中所述重組載體靶向載體。

17.權利要求14的重組載體，其中所述核酸序列編碼具有與氨基酸序列(a)至少約85％相同的氨基酸序列的乙酰乳酸合酶。