[發明專利]去除多殺菌素發酵液中色素的方法

有效

• 申請號: 200910133116.1
• 申請日: 2009-04-01
• 公開（公告）號: CN101659685A
• 公開（公告）日: 2010-03-03
• 發明（設計）人: 盧亮;李繼安;韓麗敏
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/06;B01D15/00;B01J20/08;A01P7/00
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所
• 代理人: 樓仙英;謝燕軍

技術領域

本發明屬于生物農藥生產技術領域，具體涉及一種去除多殺菌素發酵液 中色素的方法。

背景技術

多殺菌素(Spinosad)是1982年美國禮萊公司科研人員從維爾京群島土 壤中分離的刺糖多胞菌(Saccharopolyspora?spinosa)發酵液中提取得到的一 種新穎的大環內酯類超高效生物源殺蟲劑。該類化合物不僅有很高的生物 活性，而且對非靶標生物的毒性很低，對人和其他哺乳動物非常安全。在 天然多殺菌素分離提取物中，兩個最高活性組份A和D的混和物被稱為 spinosad，中文通用名為多殺菌素，它是商業化產品的主要成分。多殺菌 素主要應用于對棉鈴蟲、煙青蟲、小菜蛾、果蠅、甜菜夜蛾、薊馬等的防 治，適用于棉花、茶、蔬菜和蘋果、梨、桃等落葉果樹。到1999年多殺 菌素已經在24個國家、100多種作物上進行了注冊登記。多殺菌素具有高 殺蟲活性的同時，對捕食性昆蟲還表現出較低毒性，對鱗翅目害蟲而言， 多殺菌素是已發現的殺蟲劑中選擇性最高的化合物之一。多殺菌素的另一 個優點是對哺乳動物和鳥類相對低毒，對水生動物也只是輕微的中等毒 性，此外，哺乳動物的慢性毒性試驗表明，多殺菌素無致癌、致畸、致突 變性或神經毒性。目前，多殺菌素商業化的品種有用于棉花的Tracer，用 于蔬菜類的菜喜(Success)，以及Conerve和SpinTor。我國目前使用的有用 于蔬菜的菜喜。在美國，多殺菌素產品標簽上標明可應用于100多種作物， 同時它還在其他24個國家進行了注冊登記，并在全世界范圍內為廣大種 植者所接受。

對于多殺菌素的分離純化工藝，國內外的研究并不多，其主要方法是 利用溶媒萃取法，此法雖然也能取得一定的效果，但有機溶媒使用量大， 環境污染嚴重，利用樹脂吸附法則能克服這一缺點，但目前樹脂吸附的工 藝并不成熟，尤其是發酵液必須經過一定的預處理后樹脂才能發揮其作 用。

發表于2005年5月的華中農業大學的碩士學位論文“多殺菌素分離 純化工藝的研究”披露了一種多殺菌素的樹脂吸附法提取多殺菌素的工 藝，文獻中先對發酵液進行預處理，然后采用XAD-4大孔吸附樹脂對多 殺菌素進行粗提。此樹脂在PH5-11對多殺菌素進行吸附時均有泄露，不 能達到完全吸附的效果，并且對吸附速率也有較高的要求，不利于工藝的 放大生產。

多殺菌素的發酵液由于雜質較多，濾液混濁，目前現有技術中還沒有 一種簡單的方法能夠將發酵液的色素有效去除，并將多殺菌素的純度提到 較高的水平。

發明內容

為解決該技術問題，本發明通過動態實驗，篩選了各種吸附劑，選取 了一種效果較好的吸附劑，并對吸附條件進行了探索，使得能夠基本除去 多殺菌素發酵液中的色素，且減少了很多雜質，使多殺菌素的純度得到提 高，減輕了后面的樹脂分離的壓力，整個工藝簡單，操作十分方便。

因此，本發明提供一種去除多殺菌素發酵液中色素的方法，該方法包 括將預處理后的多殺菌素發酵液上氧化鋁柱吸附并用溶劑系統洗脫的步 驟。

所述預處理后的多殺菌素發酵液按照下列步驟得到：取多殺菌素發酵 液，離心得菌絲體，用丙酮浸泡過夜，再次離心，所得上清液即為預處理 后的發酵液。

具體處理方法：取多殺菌素發酵液3L，4000r/min，30min離心得菌絲 體，用3L的丙酮浸泡過夜，再次4000r/min，離心30min取上清，即得預 處理后的多殺菌素發酵液。

本發明所述氧化鋁柱選自酸性氧化鋁柱、中性氧化鋁柱或堿性氧化鋁 柱，考慮到多殺菌素在堿性氧化鋁和中性氧化鋁中的穩定性問題，優選酸 性氧化鋁柱。

本發明所述溶劑系統可以選自丙酮、甲醇或乙醇等，但比較下來，丙 酮能夠更好的溶解多殺菌素，且所含的雜質最少。因此所述溶劑系統優選 為丙酮水溶液，且優選丙酮濃度為80％-100％的丙酮水溶液。

本發明方法中，多殺菌素的發酵液pH一般比較穩定，基本上在2～11， 優選3～10之間。

本發明方法中，所述處理后的多殺菌素發酵液可以配成丙酮水溶液后 上柱，也可以直接上柱。但由于多殺菌素在水溶液中的溶解性不好，含水 量超過一定比例后多殺菌素會沉淀析出，不利于過氧化鋁柱，所以丙酮水 溶液的含水比例不能超過30％。同樣，洗脫用的丙酮水溶液中的含水量也 不能超過30％。

本發明去除多殺菌素發酵液中色素的方法的具體步驟如下：