[發明專利]納米小分子透明質酸及其制備方法

有效

• 申請號: 200910131776.6
• 申請日: 2009-04-02
• 公開（公告）號: CN101507733A
• 公開（公告）日: 2009-08-19
• 發明（設計）人: 杜以波;胡如桂;杜鐵柱
• 申請（專利權）人: 北京中生奧普寡肽技術研究所
• 主分類號: A61K31/728
• 分類號: A61K31/728;A61K8/73;A61P17/02;A61Q19/00;A23L1/30
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技術領域

本發明涉及一種納米小分子透明質酸的制備方法，具體地講是將大分子量的透明質酸通過酶等水解方法，獲得平均分子量1000道爾頓以下的超低分子量透明質酸，即納米級寡聚透明質酸(NOHA)。用本方法得到的納米小分子透明質酸具有與普通透明質酸顯著不同的促進血管形成、促進創傷愈合、顯著的皮膚親和性和滲透性等功能特點，可以作為良好的醫藥、保健品、化妝品原料。

背景技術

透明質酸(HA)，是存在于生物體特別是皮下組織的粘多糖類，由于其高保濕功能，作為透明質酸被廣泛應用在化妝品原料中。此外，通過口服攝取透明質酸或其鹽，補償生物體原本具有的透明質酸含量的降低，可看到改善肌膚的保濕、彈性和柔軟性的效果。因此，透明質酸或其鹽可以用于食品或藥品。

透明質酸是極高分子的多糖類，分子量從50萬到300萬道爾頓，具有高粘度，1％的水溶液已經是粘稠的了，所以，透明質酸的使用存在缺陷，用于化妝品，由于其超大分子量，其護膚作用主要體現在外部保濕，它幾乎難以滲透到皮膚內部，對于皮膚內在的營養和修護基本沒有什么作用；作為食品或食品添加劑，由于粘度高，妨礙添加量，口感差，消化吸收性能差，美容功能難以實現。

研究表明，透明質酸的生物活性與其聚合度有關，聚合度越小生物活性越高。聚合度減小，分子量降低，粘度降低，使用性能大大提高，當分子量降到1000道爾頓附近時，即得到寡聚透明質酸(聚合度小于10，分子量小于4000)，其功能大大增強，且表現出普通透明質酸所不具備的功能特性，如促進血管形成、促進創傷愈合、抗腫瘤、免疫調接等生物活性。而納米小分子透明質酸(聚合度小于5，平均分子量小于1000)，性能尤其優于高聚合度的O-HA，在皮膚上表現為極好的皮膚親和性、快速的滲透性、美容修復功能。

通過降解大分子量透明質酸，可以得到低聚合度的透明質酸。透明質酸的降解方法有多種，如物理法，通過加熱、機械剪切力、紫外線、超聲波、鈷照射等因素均可使透明質酸降解，但其降解的力度有限，難以得到納米小分子透明質酸；化學降解法，有酸水解、堿水解、次氯酸鈉氧化降解等，化學降解法降解過程較難控制，容易產生褐變和有機溶劑殘留。日本吉田拓史采用酸性介質的水解方法(專利申請號200680008997.9)，其采用乙醇或丙酮溶劑的酸性介質條件下，把透明質酸分子量降到10000一下；生物降解法，在透明質酸酶的作用下降解，降解強度低、周期長等缺點，崔向珍等在“透明質酸酶催化透明質酸水解的最適反應條件”刊文中，可以把分子量控制在10000一下。

本發明通過生物酶與酸降解結合的方法，將大分子的透明質酸降解為分子量分布在1000以下的納米小分子透明質酸。以實現其皮膚美容、細胞快速美容、便于消化吸收的目的。

發明內容

本發明的目的之一是通過酶法與酸降解法的結合，得到分子量可控的納米小分子透明質酸水解物。

一種以大分子量透明質酸或其鹽為原料，通過降解得到的納米小分子透明質酸，其平均分子量在1000道爾頓以下，透明質酸一聚體、二聚體、三聚體、四聚體含量超過90％。

一種納米小分子透明質酸的制備方法，是酸性介質水解和酶降解兩步的結合。

一種納米小分子透明質酸的制備方法，其透明質酸原料，是指透明質酸或其鹽，透明質酸是指以葡萄糖醛酸和N-乙酰胺基葡萄糖這兩種糖為重復構成單元的多糖類，其鹽類沒有限定，例如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋅鹽、鎂鹽、銨鹽等。它一般是以雞冠、臍帶、眼球、皮膚、軟骨等生物組織或者培養鏈球菌屬微生物等通過發酵法得到的透明質酸或其鹽。

一種納米小分子透明質酸的制備方法，其兩步反應所用介質是水，可以不使用有機溶劑，不使用氧化劑。

一種納米小分子透明質酸的制備方法，在酸性介質下首先水解，是指在pH值1.5～4，透明質酸濃度0.1～6％，水解溫度70～95℃，水解時間為1～5小時。

一種納米小分子透明質酸的制備方法，經過酸性介質下水解后，繼續進行酶降解，酶降解所用的酶是透明質酸酶，降解反應條件是，pH值4～7，透明質酸濃度0.1～6％，水解溫度20～70℃，水解時間為1～5小時。

用本方法得到的納米小分子透明質酸，具有高度的皮膚親和性和滲透性，能促進毛細血管的生成、促進創傷愈合、促進膠原蛋白合成。本產品用于食品，具有適口性強、口感好、易消化的特點。具有增強免疫能力、促進骨骼形成的作用，對于全身皮膚的保濕、嫩滑、降低皮膚干燥、治療皮膚粗糙、提高皮膚彈性、減輕皺紋，效果顯著。

下面結合實施例對本發明進一步說明：