[發(fā)明專利]黑芥子甙提取物的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910114514.9
• 申請日: 2009-11-01
• 公開（公告）號: CN102048791A
• 公開（公告）日: 2011-05-11
• 發(fā)明（設計）人: 宋云飛;梁遠盛;趙軍;孫步祥;湯凌志
• 申請（專利權）人: 桂林萊茵生物科技股份有限公司
• 主分類號: A61K36/31
• 分類號: A61K36/31;A61K31/7028;A61P35/00
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司 45107
• 代理人: 蘇家達

技術領域

本發(fā)明涉及植物中活性成分的制備方法，具體涉及黑芥子甙提取物的制備方法。

背景技術

早在19世紀80年代，國際委員會建議多吃十字花科蔬菜，因為十字花科蔬菜可以預防癌癥。我國十字花科植物品種主要有花椰菜、西蘭花、甘藍、蘿卜、芥菜。在十字花科植物中蕓苔屬是主要的食用蔬菜，蕓苔屬植物包括西蘭花、花椰菜、蕪箐、焦青甘藍、羽衣甘藍、芥菜等。流行病學數(shù)據(jù)已表明，富含十字花科蔬菜的飲食，如西蘭花、花椰菜、甘藍等能減小許多癌癥的發(fā)病率。目前一致認為，十字花科植物的重要抗癌活性成分前體是硫代葡萄糖苷(Glucosinolates)。在天然植物中已發(fā)現(xiàn)120多種不同的硫代葡萄糖苷，它們存在于11個不同種屬的雙子葉被子植物中，最重要的是十字花科，所有的十字花科植物都能夠合成硫代葡萄糖苷。硫代葡萄糖苷存在于這些植物的根、莖、葉和種子中，但主要存在于種子中。硫代葡萄糖苷在一些十字花科植物中的含量大約占干重的1％，在一些植物種子中的含量達到10％。但是，硫代葡萄糖苷在植物中的含量變化很大，不同品種、不同生長環(huán)境以及同一植株的不同生長階段、同一植株的不同部位含量都存在差別，如Glucorapha-nine在西蘭花嫩芽中的含量是成熟植株或花的10～100倍。

所有硫代葡萄糖苷都由一個含糖基團、硫酸鹽基團和可變的非糖側鏈(R)組成。基于R基團的不同，硫代葡萄糖苷可以分為3類：脂肪族硫代葡萄糖苷、芳香族硫代葡萄糖苷和吲哚硫代葡萄糖苷。黑芥子甙(Sinigrin)是其中脂肪族硫代葡萄糖苷中研究得較多的一種，黑芥子甙的R基團是烯丙基，因此黑芥子甙也叫烯丙基硫代葡萄糖苷。現(xiàn)有很多報道都是從十字花科植物中提取硫代葡萄糖苷的方法，如涂宗財?shù)劝l(fā)表的《芥菜中硫代葡萄糖苷提取工藝條件的優(yōu)化》(食品與生物技術學報，2007年11月，第26卷第6期，9～12頁)一文中，通過單因素和正交試驗得到最佳的從芥菜中提取硫代葡萄糖苷的工藝條件為：體積濃度80％的乙醇提取2次，每次提取20分鐘，提取溫度80℃，原料料液比為(g/mL)1∶7，粒度大小為20目，芥菜中硫代葡萄糖苷的提取量為22.146μmol/g。目前還未見有從十字花科植物中提取制備黑芥子甙提取物的相關報道。

發(fā)明內容

本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種工藝簡單、易操作，提取率高的黑芥子甙提取物的制備方法。

本發(fā)明所述的黑芥子甙提取物的制備方法，包括以下步驟：

1)取原料，粉碎，乙醇煮沸保溫提取，提取液離心，收集上清液；其中，所述原料為十字花科蕓苔屬植物芥菜、甘藍或西蘭花；優(yōu)選選用芥菜種子、甘藍種子或西蘭花花蕾或嫩芽；

2)向上清液中加入乙醇，調節(jié)其中乙醇濃度為80～85％(質量)，放置1～1.5小時，離心，收集二次離心液；

3)二次離心液濃縮至無醇味，所得濃縮離心液過0.5μm的陶瓷膜，透過液濃縮至原料重量的2～3倍，得濃縮透過液；

4)濃縮透過液進大孔樹脂柱，收集流出液，用2～3倍樹脂重量的水洗脫，收集洗脫液，合并流出液和洗脫液，濃縮，冷凍干燥，即得黑芥子甙提取物。

上述提取方法的步驟1)中，提取用乙醇的體積濃度為60～80％，提取次數(shù)為1～2次，每次1～2小時；當原料為新鮮原料時，提取時的料液比為1∶2～3(W/V，即1克的原料用2～3毫升的提取液提取)，當原料為干燥原料時，提取時的料液比為1∶7～10(W/V，即1克的原料用7～10毫升的提取液提取)。

步驟2)中，可將上清液濃縮至原料重量的0.5～3倍后再調節(jié)其中的乙醇濃度。

步驟4)中，大孔樹脂的型號為D101、DM130、DM132、DM312或DM2。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明提供了一種從十字花科蕓苔屬植物芥菜、甘藍或西蘭花中提取制備黑芥子甙提取物的方法，該方法通過對原料進行高醇提取、對提取液離心分離后的上清液進行醇沉以及陶瓷膜過濾，有效去除其中中的大分子蛋白質及多糖，再經大孔樹脂柱分離得到黑芥子甙提取物。該方法工藝簡單、易操作，得到的產品中黑芥子甙含量可達20～40％，避免了黑芥子甙的氧化，黑芥子甙的提取率為80％以上。

具體實施方式

實施例1黑芥子甙提取物的制備方法，包括以下步驟：

1)取干燥的芥菜種子，粉碎，用相當于原料重量8倍、60％(v/v)的乙醇水溶液煮沸保溫提取2小時，過濾，殘渣再用相當于原料重量10倍、60％(v/v)的乙醇水溶液提取1小時，過濾，合并提取液，離心，收集上清液；

2)向上清液中加入無水乙醇，直至該混合液中乙醇濃度為80％(質量)，放置1小時，離心，收集二次離心液；