[發明專利]一種銹毛莓多糖的提取方法

無效

• 申請號: 200910112934.3
• 申請日: 2009-12-09
• 公開（公告）號: CN101709092A
• 公開（公告）日: 2010-05-19
• 發明（設計）人: 魏道智;寧書菊;施恩靜
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域??本發明涉及一種從植物體內提取多糖類物質的方法，具體涉及銹毛莓多糖的提取方法。

技術背景??銹毛莓(Rubus?reflexus?Ker)又名蛇包簕、大葉蛇簕(廣東)、山煙筒子(廣西)，系薔薇科類懸鉤子屬植物。攀援灌木，枝被銹色茸毛，疏生小刺。單葉，心狀長卵形，上面無毛，下面密被銹色茸毛，沿葉脈有長茸毛，邊緣3～5裂，有不整齊粗鋸齒或重鋸齒。葉柄被茸毛，疏生小刺。托葉倒卵形，被長柔毛?；〝刀鋱F聚腋生或組成頂生總狀花序，總花梗和花梗密被銹色長柔毛。苞片與托葉類似，花白色，花萼外面密被銹色長柔毛和茸毛，萼片卵形，頂端掌狀分裂?；ò觊L圓形，與萼片等長。雄蕊短，花絲寬扁。果近球形深紅色。

銹毛莓有銹毛莓Rubus?reflexus?Ker?var.(原變種)、長葉銹毛莓Rubus?reflexus?Ker?var.orogenes?Hand.-Mazz.(變種)、淺裂銹毛莓Rubus?reflexus?Ker?var.hui(Diels)Metc(變種)、深裂銹毛莓Rubus?reflexus?Ker?var.lanceolobus?Metc(變種)和大葉銹毛莓Rubus?reflexus?Ker?var.macrophyllus?Yüet?Lu(變種)等。其中銹毛莓(原變種)、長葉銹毛莓(變種)為目前國內有較詳細報道的2種，銹毛莓(原變種)分布于江西，湖南，浙江，福建，臺灣，廣西；長葉銹毛莓(變種)分布于江西、湖北、湖南、廣西、貴州。

銹毛莓其根莖均可入藥，民間廣泛用于治療各型肝炎，有良好的民間用藥基礎。但目前國內外尚未見銹毛莓化學成分報道，也未見銹毛莓提取物及用途的報道。

發明內容??本發明的目的是提供一種銹毛莓多糖的提取方法，為進一步研究開發新藥提供基礎。

本發明的目的是通過以下方法實現的。

本發明的銹毛莓多糖的提取方法，包括材料選擇、破碎、粗提、濃縮、提取、萃取、抽濾和干燥，具體方法如下：

1.材料選擇：選取銹毛莓干草的莖桿，重力破碎，一般破碎至0.5～1.0cm；

2.粗提：將干燥的銹毛莓莖桿60℃溫水浸泡不低于8h；60℃熱水浴回流提取3h，提取3次，合并提取液；

3.濃縮：用真空旋轉濃縮儀，80℃水浴條件下，旋轉蒸發濃縮至總提取液體積的1/3；

4.提取：取濃縮水提液，加入無水乙醇，使醇濃度不低于70％(V/V)，4℃冷藏不少于12h，布氏漏斗抽濾并真空旋轉蒸發濃縮至無醇；

5.萃取：4℃冷藏8h后，置分液漏斗中用乙醚萃取，取濃縮液中脂溶部分，共萃3次，合并萃后濾液加無水乙醇，使最后醇濃度不低于80％(V/V)，置冰箱中4℃靜置不少于8h；

6.抽濾：去上清液得沉淀，加2倍量(V/V)無水乙醇攪拌后抽濾，棄濾液，得濾物；

7.干燥：將濾物用無水乙醇洗滌3次，真空冷凍干燥機干燥后得多糖。

本發明的銹毛莓多糖的提取方法，具有提取方法簡單、多糖的得率高、純度高的優點，而且成本低廉，試劑可以回收利用。本發明的銹毛莓多糖的提取方法，多糖得率可達1.21％。

具體實施例??為了充分公開本發明的銹毛莓多糖的提取方法，以下結合實施例加以說明。

實施例1：銹毛莓多糖的提取方法

銹毛莓多糖的提取方法，包括以下步驟：

1、材料選擇：選取銹毛莓莖桿，洗凈曬干備用；

2、破碎：將干燥的銹毛莓莖桿重力破碎至1.0cm；

3、粗提：將干燥的銹毛莓莖桿60℃溫水浸泡8h；60℃熱水浴回流提取3h，提取3次，合并提取液；

4、濃縮：用真空旋轉濃縮儀，80℃水浴條件下，旋轉蒸發濃縮至總提取液體積的1/3；

5、提取：取濃縮水提液，加入無水乙醇，使醇濃度為70％(V/V)，4℃冷藏12h，布氏漏斗抽濾并真空旋轉蒸發濃縮至無醇；

6、萃?。?℃冷藏8h后，置分液漏斗中用乙醚萃取，取濃縮液中脂溶部分，共萃3次，合并萃后濾液加無水乙醇，使最后醇濃度為80％(V/V)，置冰箱中4℃靜置8h；

7、抽濾：去上清液得沉淀，加2倍量(V/V)無水乙醇，攪拌后抽濾，棄濾液，得濾物；

8、干燥：將濾物用無水乙醇洗滌3次，真空冷凍干燥機干燥后得多糖。

本發明的產物經紅外光譜多糖特征峰鑒定和紫外檢測蛋白和核酸吸收、應用Molisch反應(α-萘酚反應)方法鑒定為多糖，并運用蒽酮-硫酸比色法測定了多糖含量。