[發明專利]膠體金標記試紙條鑒別蛇毒的方法

無效

• 申請號: 200910103166.5
• 申請日: 2009-02-10
• 公開（公告）號: CN101482564A
• 公開（公告）日: 2009-07-15
• 發明（設計）人: 姚婕;劉明華;府偉靈
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第三軍醫大學第一附屬醫院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/531
• 代理公司: 重慶市前沿專利事務所
• 代理人: 郭 云

1、一種膠體金標記試紙條鑒別蛇毒的方法，其特征在于按如下步驟進行：

(1)制作蛇毒種特異性抗體，將一個地區常見的4～8種毒蛇的蛇毒取出，分別多點皮內注射免疫家兔，再放取每一種蛇毒免疫的家兔血進行離心取血清，通過protein?A柱純化得到每一種毒蛇IgG抗體備用；再將每一種毒蛇免疫家兔得到的純化IgG抗體與該毒蛇毒素偶聯的CNBr-激活的瓊脂糖4B柱中抗原結合，洗脫雜蛋白，得到純化的蛇毒抗體備用；最后將每一種純化的蛇毒抗體依次通過其余幾種毒蛇的毒素偶聯的CNBr-激活的瓊脂糖4B柱，得到不與其它毒蛇毒素結合的種特異性抗體；

(2)制作蛇毒鑒別膠體金標記試紙條，設置底紙條(1)，該底紙條(1)上端設有手柄(2)，該底紙條(1)下端粘貼有膠體金標記的纖維薄膜(3)，在所述手柄(2)與纖維薄膜(3)之間的底紙條(1)上貼有硝酸纖維素膜(4)，所述硝酸纖維素膜(4)靠手柄(2)的一端從上到下依次標記有陽性對照(5)和陰性對照(6)，該陰性對照(6)與纖維薄膜(3)之間的硝酸纖維素膜(4)上標記由步驟(1)制備的4～8種蛇的蛇毒種特異性抗體(7)；所述纖維薄膜(3)上段包裹有步驟(1)所述4～8種蛇的蛇毒種特異性抗體的復合特異性抗體；

(3)蛇毒鑒別，取蛇咬者的血清沾在步驟(2)制得的蛇毒鑒別膠體金標記試紙條的纖維薄膜下端，血清經纖維薄膜向上移動，血清中的抗原首先與纖維薄膜上段的蛇抗兔的復合特異性抗體相對應的蛇毒抗體相結合，再與硝酸纖維素膜上標記的相對應的一種特異性蛇毒抗體結合變色，硝酸纖維素膜上標記的陽性對照也同時顯色而陰性對照沒有顯色，觀察硝酸纖維素膜上標記哪種毒蛇蛇毒種特異性抗體顯色則為哪種蛇毒，就能正確判定蛇毒種類。

2、根據權利要求1所述膠體金標記試紙條鑒別蛇毒的方法，其特征在于：所述步驟(2)中標記在硝酸纖維素膜上的每種蛇毒種特異性抗體之間有間距。

3、膠體金標記試紙條鑒別蛇毒的方法，其特征在于：所述步驟(2)中在硝酸纖維素膜上標記羊抗兔抗體作為陽性對照(5)；在所述硝酸纖維素膜上標記除蛇毒種特異性抗體以外的其他抗體作為陰性對照(6)。