[發(fā)明專利]用于熒光定量PCR法檢測腸道近平滑念珠菌的試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910098559.1 | 申請日： | 2009-05-14 |
| 公開（公告）號： | CN101555526A | 公開（公告）日： | 2009-10-14 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陳瑜;郭仁勇;李蘭娟;魯海峰;陳珍晶 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江大學(xué) |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;G01N21/64;C12R1/72 |
| 代理公司： | 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 | 代理人： | 唐銀益 |
| 地址： | 310027浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 熒光 定量 pcr 檢測 腸道 平滑 念珠菌 試劑盒 | ||
1.一種用于熒光定量PCR法檢測腸道近平滑念珠菌的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括：
反應(yīng)總體積1/10的10×Taqman?PCR?buffer；
各0.15μmol/L～1μmol/L的上游和下游引物；
各200μmol/L的dATP、dTTP、dGTP、dCTP；
2.0mmol/L～3.5mmol/L的MgCl2；
0.05U/μl?HOTSTART?Taq?DNA聚合酶；
0.02×SYBR?green?I熒光染料；
標(biāo)準(zhǔn)陽性模版，其濃度按定量標(biāo)準(zhǔn)曲線制備的要求系列稀釋；
余量為無菌雙蒸水；
所述兩條引物為PCR擴(kuò)增過程中使用的特異性擴(kuò)增近平滑念珠菌ITS區(qū)的引物，其中：
上游引物序列為：5’-CCTGTCCATTAGTTTATACTCCGC-3’；
下游引物序列為：5’-AGATTAAACTCAACGAA-3’；
所述標(biāo)準(zhǔn)陽性模版為近平滑念珠菌標(biāo)準(zhǔn)菌株DNA經(jīng)前述引物擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物與pGEMT-TEasy載體連接后獲得的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒DNA；擴(kuò)增產(chǎn)物的序列與SEQ?ID?NO：3所示的核苷酸序列一致。
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