[發明專利]藥用真菌的隔離式發酵培養方法

無效

• 申請號: 200910097228.6
• 申請日: 2009-03-26
• 公開（公告）號: CN101519666A
• 公開（公告）日: 2009-09-02
• 發明（設計）人: 鄭勇軍
• 申請（專利權）人: 鄭勇軍
• 主分類號: C12P1/02
• 分類號: C12P1/02;C12R1/79
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及藥用真菌的一種發酵培養方法。

背景技術

藥用真菌一般泛指具有保健或藥用價值的真菌。包括藥用真菌在內的微生物的發酵培養有兩類：固態發酵和液體發酵。固態發酵是一種古老的發酵技術，主要是指在固態基質(培養基)上，在無水或者接近無水的條件下進行微生物的培養。固態發酵由于存在散熱困難，傳質不均，供氧困難等一些難以克服的缺點，其應用和發展受到很大限制。液體發酵是培養基為液體的微生物培養過程。很好的解決了固態發酵中存在的問題，在現代的發酵工業中，占據了產量和數量上的絕對優勢。然而液體發酵與固態發酵比較，也存在一些不足，如大量工業三廢的排放，后處理工藝繁瑣等。

藥用真菌的液體發酵技術借鑒了抗生素的生產工藝，其生產的機械化、自動化程度高，已廣泛用于藥用真菌的大規模生產。但是藥用真菌與其產品的性質與抗生素類有一定的區別，例如：藥用真菌的菌絲生長模式不同于單細胞的生長方式，藥用真菌和抗生素菌種的目標產物有較大的區別。在引鑒抗生素工藝中，根據藥用真菌的實際情況，其發酵培養方法尚有繼續改進的必要性。

發明內容

本發明的目的是提供一種藥用真菌的發酵培養方法。

本發明結合藥用真菌的生長特性及目標產物的狀況，在液態發酵工藝中，應用廣泛用于水處理、分離純化等領域的半透膜，將液體培養基和藥用真菌菌種隔離后進行培養。

本發明公開了一種藥用真菌的發酵培養方法，包括在無菌培養容器中，將液體培養基和藥用真菌的菌種用半透膜進行隔離；半透膜一側的無菌培養腔容納液體培養基；在半透膜另一側的膜表面接種真菌菌種，該側的無菌培養腔作為真菌生長的空間，在適合真菌生長的條件下進行真菌的發酵培養。

培養結束后，只需刮下半透膜一側的菌絲體，即獲得菌絲和被半透膜截留的分泌到菌絲外周的代謝產物。

上述無菌培養容器中，作為真菌生長空間的一側僅接種真菌菌種，不另加入提供營養的液體培養基。

為了提供真菌生長過程中所需要的氧氣，上述作為真菌生長空間一側的無菌培養腔還流通無菌空氣，以供應氧氣和排出二氧化碳。

上述半透膜一側的無菌培養腔需充滿液體培養基，排除半透膜和培養基之間的氣泡，使培養基和半透膜之間緊密接觸，確保半透膜一側的整個面上，液體培養基中的營養物質能均勻地自由擴散至膜的另一側。容納液體培養基的培養腔中無需攪拌裝置，也無需通入無菌空氣。

上述半透膜的作用是將液體培養基和菌種隔離在半通透性膜的兩側，使液體培養基中真菌培養所需的碳源，氮源，礦物質，微量元素，生長素等營養物質能夠自由擴散至半透膜的另一側，培養出的菌絲和代謝產物被截留在半透膜的另一側。為了達到上述目的，半透膜上密布有連通膜兩側的微孔，微孔大小(孔徑)范圍在1000道爾頓分子直徑大小-2微米之間的范圍。液體培養基中，除氮源外的大部分營養物質的分子量均小于1000道爾頓，氮源物質經蛋白酶處理后，轉化成分子量低于1000道爾頓的較小分子，因此小于半透膜孔徑的營養物質均能夠自由擴散通過半透膜；而一般藥用真菌的菌絲直徑在2-10微米之間，被半透膜截留在單側生長(接種菌種的一側)，不能穿過半透膜生長到另一側(液體培養基的一側)。此外，菌絲一般在外周微環境中分泌具有藥用價值的代謝產物，在菌絲生長環境與液體培養基隔離，生長環境基本無游離水的狀態下，以及半透膜的半通透、半封閉的作用下，代謝產物基本被固定在菌絲周邊，被截留在半透膜的菌絲體一側。

上述半透膜可以是薄膜狀，或者有一定厚度和支撐強度的薄片狀。膜的厚度以不影響真菌生長過程中，營養物質及時擴散至真菌生長一側為選擇依據，優選0.05毫米-0.3毫米。

半透膜可為各種材質，可以是有機高分子材質、無機物材質、廣泛用于水處理，分離純化等領域的各種半透膜材質等，如：纖維素類、聚砜類、聚丙烯、無機陶瓷等。

上述半透膜可以是平面的或卷成圓柱狀等多種形式。具體的形式可以是平面式的，將液體培養基和菌種隔離在左右兩側或者上下兩側，可以是多層半透膜平行疊放的結構，如無菌培養容器由多層半透膜隔離出多個容納液體培養基的培養腔和作為真菌生長空間的培養腔，且容納液體培養基的培養腔和作為真菌生長空間的培養腔間隔排列。為了節省空間，可以卷成圓柱狀，即類似水處理設備中常用的卷式膜芯結構。總之，培養過程中應用半透膜的設備可以加工成多種形式。