[發明專利]整合素配體環肽類似物及其環化方法

無效

• 申請號: 200910096516.X
• 申請日: 2009-03-05
• 公開（公告）號: CN101492494A
• 公開（公告）日: 2009-07-29
• 發明（設計）人: 劉雅琴;徐宇虹
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07K5/11
• 分類號: C07K5/11;C07K7/06
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司
• 代理人: 唐銀益

1、一種整合素配體環肽類似物，其結構如下：

2、一種權利要求1所述的整合素配體環肽類似物的環化方法，包括以下步驟：

(1)將Fmoc-Asp-propargyl掛在2-CTC樹脂上，合成線性的四肽類似物：

稱取1g?2-CTC樹脂于固相反應器中，加DCM15ml溶脹，洗滌樹脂；往溶脹好的樹脂中加Fmoc-Asp-propargyl和DIPEA，室溫下反應2.5h，用3×20ml的EA和10ml的水洗滌；用20％的哌啶/DMF溶液脫除Fmoc，反應20分鐘；用3×20ml的EA和10ml的水洗滌，加入Fmoc-Gly-OH、苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸酯和N-甲基嗎啉至反應器中，反應2h，用茚三酮指示劑檢測反應，用3×20ml的EA和10ml的水洗滌；用20％的哌啶/DMF溶液脫除Fmoc，反應20分鐘；用3×20ml的EA和10ml的水洗滌；

采用相同的操作步驟，依次縮合Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Xaa-OH和Azido-glycine生成線性的四肽類似物。

(2)環化：

將線性的全保護的四肽類似物從樹脂上切下來，用裂解液2∶8的TFE/DCM及數滴AcOH，裂解2h，旋干裂解液；在DCM作溶劑，CuBr/DBU作催化劑的液相條件及室溫下反應4～6小時，反應后旋去DCM，加裂解液去除側鏈保護裂解2h，旋去裂解液，加冰乙醚沉淀，離心除去上清液得到固體，即為最終產物整合素配體環肽。

3、根據權利要求2所述的整合素配體環肽類似物的環化方法，其特征在于，所述Fmoc-Asp(OtBu)-OH通過以下方式制得：

(1)將6g疊氮鈉溶解于150ml的圓底燒瓶中，再加入24ml的DCM，冰浴冷卻至0℃，攪拌20分鐘；反應混合物用2×12mlDCM萃取；合并有機相，用飽和碳酸鈉洗滌，即得到溶解于DCM的三氟甲磺酰疊氮，無需進一步純化直接加入下一步反應使用；

(2)將0.675g甘氨酸、1.783g的K₂CO₃、0.0226g的CuSO₄加入到圓底燒瓶中，再加入30ml水、60ml甲醇和48ml含有三氟甲磺酰疊氮的DCM，在室溫下攪拌，反應24小時；隨后將反應混合物減壓旋轉蒸發去除有機溶劑，剩下的部分用150ml水稀釋，然后用鹽酸調pH值至6，加磷酸緩沖液稀釋，再用4×60ml的EA萃取以去除有機相中的磺胺副產物；水相再用鹽酸調pH值至2，用3×60mlEA萃取；合并有機相，用MgSO₄干燥，減壓干燥，得到金黃色的油狀液體，即為Fmoc-Asp(OtBu)-OH。