[發明專利]孝順竹高效穩定再生體系建立的方法

無效

• 申請號: 200910096294.1
• 申請日: 2009-03-05
• 公開（公告）號: CN101822212A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發明（設計）人: 顧小平;袁金玲;岳晉軍
• 申請（專利權）人: 顧小平;袁金玲;岳晉軍
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00;C12N5/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.孝順竹(Bambusa?multiplex)高效穩定再生體系建立的方法，其特征包括：外植體消毒、愈傷組織誘導與增殖、愈傷組織分化與生根、以及壯苗移栽過程，具體步驟如下：

(1)外植體消毒：選擇健康飽滿的種實先用75％(v/v)乙醇處理1分鐘；再用0.1％(w/v)升汞(每升加5-6滴吐溫-80)浸泡15分鐘；然后用無菌水沖洗數次；最后用無菌紙吸干種實表面水分后待接種。

(2)愈傷組織誘導與增殖：將消毒后的外植體接種到愈傷組織誘導培養基上暗培養3-14天使愈傷組織形成；然后將色澤淡黃致密的愈傷組織分離出來接種到繼代增殖培養基上暗培養14-21天。所述誘導與增殖培養基是以NB培養基為基礎，添加：2，4-D(2-10mg/L)、卡拉膠(8-10g/L)、脯氨酸(400-600mg/L)、谷氨酰胺(400-600mg/L)、水解酪蛋白(200-400mg/L)。

(3)愈傷組織分化與生根：將繼代增殖培養后的愈傷組織接種到預分化培養基上培養3-7天；然后轉到分化培養基上培養10-30天；待愈傷組織產生0.1-1.5cm叢芽后將叢芽切割下來接種到生根培養基上，7-15天后叢芽生根。光照時間12小時/日，光照強度800-2000lux。所述預分化培養基是以MS培養基為基礎，添加KT(2-5mg/L)、6-BA(2-5mg/L)、卡拉膠(8-10g/L)。分化培養基是以MS培養基為基礎，添加卡拉膠(8-10g/L)。生根培養基以MS培養基為基礎，添加NAA(1-5mg/L)、卡拉膠(8-10g/L)。

(4)壯苗與移栽：將生根的再生竹株移栽到壯苗培養基中培養7-15天；開瓶煉苗2-3天；取出小苗清洗根部培養基；再用低濃度高錳酸鉀溶液清洗根部；然后將小苗栽植到滅菌的介質中，遮陰散射光培養一個月后多數幼苗成活。所述的壯苗培養基是以MS培養基為基礎，添加NAA(2-5mg/L)、BA(2-5mg/L)、卡拉膠(8-10g/L)。