[發(fā)明專利]一種噴司他丁的提取純化方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910096059.4
• 申請日: 2009-02-06
• 公開（公告）號: CN101798330A
• 公開（公告）日: 2010-08-11
• 發(fā)明（設計）人: 朱健;陳俊勇;謝祥茂;朱亮
• 申請（專利權）人: 杭州華東醫(yī)藥集團生物工程研究所有限公司
• 主分類號: C07H19/23
• 分類號: C07H19/23;B01D15/36
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明涉及一種噴司他丁的提取純化方法，特別是一種噴司他丁的去除雜質脫色方法。

背景技術

噴司他丁的化學名為(8R)-3-(2-脫氧-β-D-赤-戊呋喃糖基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1，3]二氮雜草-8-醇，是擬嘌呤類的抗腫瘤藥，主要用于毛細胞白血病(hairy?cell?leukemia，縮寫HCL)等的治療。

噴司他丁的生產方法有發(fā)酵法和合成法，以發(fā)酵法更為經濟。發(fā)酵過程中產生了大量深褐色的色素等雜質，因此需要用適當?shù)姆椒ㄟM行去除雜質、脫色處理。現(xiàn)有的生產工藝采用活性炭去除雜質，但實際效果并不理想，處理后溶液顏色并沒有顯著變化，而且活性炭選擇性差，對噴司他丁有較強的吸附作用，致使收率較低，因此需要尋找更有效的提純方法。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種噴司他丁的提取純化的方法，以降低噴司他丁發(fā)酵液中的雜質，使后續(xù)提取純化工序更容易進行。

本發(fā)明提供的噴司他丁的提取純化方法，包括以下步驟：

1)、發(fā)酵液預處理：用堿性溶液將噴司他丁發(fā)酵液的pH調至7.8～10.2，加入助濾劑，過濾，得到噴司他丁濾液；

2)、去除雜質：噴司他丁濾液以每分鐘0.005～0.05倍填充床體積的速率泵入填裝了經預處理的強堿性陰離子交換樹脂的層析柱，收集流出液A；

3)、淋洗：濾液全部上完后再泵入0～4倍填充床體積純化水，淋洗層析柱，收集流出液B；

4)、合并流出液A、B。

其中步驟1中所述pH優(yōu)選調至8.0～9.0。助濾劑可以為硅藻土助濾劑、珍珠巖助濾劑，其中珍珠巖助濾劑助濾效果更好，而且價格更低廉，因此優(yōu)選珍珠巖助濾劑。

其中步驟2中所述的強堿性陰離子交換樹脂為苯乙烯-二乙烯苯共聚體上帶有季銨基[N-(CH₃)₂C₂H₄OH]的陰離子交換樹脂。比如D201樹脂、D241樹脂、D202樹脂或D261樹脂中的一種。其預處理為常規(guī)的酸堿處理，其中堿性溶液可以為氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液。其中氫氧化鈉溶液價格更低廉，所以優(yōu)選氫氧化鈉溶液。

其中步驟2中的速率優(yōu)選為每分鐘0.01～0.02倍填充床體積。

其中步驟3中的純化水可以不加，層析柱直接漏空；如果為了完全回收有效成分，可以增加純化水的體積，純化水的體積優(yōu)選為1～2倍填充床體積。

噴司他丁濾液呈深褐色，經過強堿性陰離子交換樹脂的吸附層析處理后，得到淺黃色溶液，而噴司他丁的回收率達到95％以上，這說明強堿性陰離子交換樹脂對噴司他丁濾液中的色素等雜質具有高度的選擇性，而基本上不吸附噴司他丁。本發(fā)明還從利于產業(yè)化出發(fā)，選擇的各個物料在保證脫色效果最佳的同時，還具有成本優(yōu)勢。

具體實施方式

實施例1

用氫氧化鈉溶液將噴司他丁發(fā)酵液的pH調至7.9，加入3％(w/v)珍珠巖助濾劑，經板框過濾，得到噴司他丁濾液。將700ml?D261樹脂(上海華震科技貿易公司生產)裝入Φ50X400mm的層析柱中，對樹脂進行酸洗(2升2mol/L鹽酸浸泡6小時)、水洗(純化水洗滌至中性)、堿洗(2升2mol/L氫氧化鈉浸泡6小時)、水洗(純化水洗滌至中性)，得到預處理的D261樹脂。取5升噴司他丁濾液，以每分鐘25ml的速率泵入層析柱，收集流出液A。濾液全部上完后再泵入1300ml升純化水，淋洗層析柱，收集流出液B。合并流出液A、B，呈淺黃色，而噴司他丁的回收率為96.8％。

實施例2

用氫氧化鈉溶液將噴司他丁發(fā)酵液的pH調至8.9，加入4％(w/v)硅藻土助濾劑，經板框過濾，得到噴司他丁濾液。將700ml?D201樹脂(上海華震科技貿易公司生產)裝入Φ50X400mm的層析柱中，按常規(guī)方法用酸堿對樹脂進行處理，得到預處理的D201樹脂。取5升噴司他丁濾液，以每分鐘8ml的速率泵入層析柱進行脫色處理，收集流出液A。濾液全部上完后再泵入800ml升純化水，淋洗層析柱，收集流出液B。合并流出液A、B，流出液呈淺黃色，噴司他丁的回收率為95.3％。