[發明專利]一種飼用β-甘露聚糖酶及其制備方法

有效

• 申請號: 200910095505.X
• 申請日: 2009-01-19
• 公開（公告）號: CN101481674A
• 公開（公告）日: 2009-07-15
• 發明（設計）人: 許堯興;王有良;李艷麗;許少春;柳永
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院;浙江湖州笑果生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/42;A23K1/165;C12R1/685
• 代理公司: 杭州豐禾專利事務所有限公司
• 代理人: 沈伾伾

1.一種高產β-甘露聚糖酶的黑曲霉(Aspergillus?niger)菌株MA-56，其菌種保藏號為CGMCC?No.2722。

2.一種飼用β-甘露聚糖酶，其特征在于：該飼用β-甘露聚糖酶以黑曲霉(Aspergillus?niger)菌株MA-56?CGMCC?No.2722為生產菌種，接種于由麩皮、豆粕和魔芋粉按重量份60～90∶10～40∶1～6比例配制成的固體培養基中，經發酵、培養、烘干、檢測后獲得。

3.一種制備權利要求2所述飼用β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于按以下步驟進行：

(1)黑曲霉(Aspergillus?niger)菌株MA-56?CGMCC?No.2722各級培養基的配制：包括，

①斜面種子培養基：去皮馬鈴薯200g/l，蔗糖20g/l，瓊脂20g/l，自然pH，經0.1Mpa滅菌20min；

②固體種子培養基：300ml三角瓶中裝入由麩皮、豆粕和魔芋粉按重量份80∶19∶1比例配制而成的培養基10g，按與固形物重量1∶1比例加入自來水，攪拌均勻，經0.1Mpa滅菌30min；

③固體生產培養基：先將麩皮、豆粕和魔芋粉按重量份60～90∶10～40∶1～6比例配制成固體培養基；再將該固體培養基與水按重量1∶0.9～1.3的比例加水并攪拌均勻，裝入布袋中，經0.1Mpa滅菌30min，冷卻后均勻置于曲盤中，發酵物料厚度為2～3cm；

(2)斜面種子制備：將黑曲霉菌株MA-56劃線接種在步驟(1)①斜面種子培養基上，于28℃下恒溫培養5d后，放置4℃冰箱內保存，備用；

(3)固體種子制備：將步驟(2)斜面種子用無菌蒸餾水制備成濃度為1×10⁷～10⁸個/ml的孢子懸浮液后，吸取2ml接入步驟(1)②固體種子培養基中，于28℃下恒溫培養3d，再與無菌蒸餾水按重量1∶100比例攪拌混合后，用雙層紗布在無菌條件下過濾，得到濃度為1×10⁷～10⁸個/ml固體種子孢子懸浮液，備用；

(4)發酵生產：將步驟(3)固體種子孢子懸浮液與步驟(1)③固體生產培養基按重量份15～30∶100比例混合均勻后，置28℃曲房中發酵培養56h得飼用β-甘露聚糖酶酶曲；

(5)酶曲的后處理、質量檢測及包裝：將步驟(4)酶曲置40℃鼓風條件下烘干10h、粉碎、過80目篩，得酶干曲；將經飼用β-甘露聚糖酶活力檢測達到1×10⁵～1.3×10⁵U/g的酶干曲包裝、封口即成產品。