[發明專利]早老綜合征所致ALT腫瘤的特有p53突變蛋白-p53N236S及其應用

無效

• 申請號: 200910095184.3
• 申請日: 2009-11-12
• 公開（公告）號: CN101805738A
• 公開（公告）日: 2010-08-18
• 發明（設計）人: 羅瑛
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C07K14/47;C12Q1/68;C12Q1/02;G01N33/53;A61K49/00;A61K48/00;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 昆明今威專利代理有限公司 53115
• 代理人: 賽曉剛

技術領域

本發明具體地，涉及一種腫瘤抑制基因p53的點突變導致的突變蛋白p53N236S 及其功能，該突變蛋白功能的發現可應用于腫瘤診斷、抗腫瘤藥物的篩選及腫瘤治 療策略的制定，屬于生物技術領域。

背景技術

人類的早老綜合癥(Werner?Syndrome，WS)是一種常染色體隱性突變遺傳病， 表現為明顯的提早衰老(premature?aging)及壽命縮短，平均存活年齡只有46-48 歲。常見病癥還包括軟組織骨肉瘤(soft?tissue?sarcoma)、早發性動脈粥樣硬化、 出血性心臟病、骨質疏松、白內障、二型糖尿病等(Epstein，Martin?et?al.1966)。 Salk等分離出WS病人的成纖維母細胞，發現這些細胞的染色體極其不穩定，呈現 所說的馬賽克染色體(translocation?mosaicism)(Salk，Au?et?al.1981)。進 一步的研究發現，WS是由于Wrn基因突變引起的。Wrn基因編碼的WRN蛋白屬于 DNA解旋酶RecQ家族，參與DNA復制、重組及DNA損傷修復，因此在維持染色體的 穩定性方面起著關鍵作用。在人類疾病中，RecQ家族基因突變導致腫瘤易感性 (cancer?predisposition)，如Bloom氏綜合癥(Bloom’s?Syndrome)。很重要的 是，只有WS表現出明顯的提早衰老的癥狀。因此，WS是人類研究人類衰老與染色 體不穩定性、腫瘤發生的相關性的很好的模型。

為了建立早老綜合癥的小鼠模型，兩個不同的實驗室的研究者試圖在小鼠中敲 除Wrn基因。然而，單獨敲除Wrn基因的小鼠(Wrn^-/-)并不表現早衰的癥狀(Lebel and?Leder?1998；Lombard，Beard?et?al.2000)。進一步的研究發現，WS病人的 成纖維母細胞的端粒縮短(telomere?erosion)較快，過量表達端粒酶的蛋白組分 TERT可以緩解端粒縮短，并且緩解細胞的衰老(senescence)(Wyllie，Jones?et?al. 2000)。這一發現提示了端粒縮短引發的端粒功能異常是導致WS病人早老病癥的關 鍵。同時，這一發現也提示了單獨敲除Wrn基因的小鼠不表現早衰癥狀的原因。人 的體細胞端粒酶活性低于檢測水平，同時，人的體細胞端粒長度也較短(12-20kb)。 與人類不同，小鼠體細胞仍然保持端粒酶的活性，且端粒長度在15-80kb，不會導 致端粒功能異常，因而Wrn^-/-小鼠不表現出早衰的癥狀。基于這一假說，Dr.Sandy Chang在世界上首次成功地建立了WS的小鼠模型。該模型雙重基因敲除了端粒酶 的RNA組分mTerc與Wrn基因(mTR^-/-Wrn^-/-)，忠實地再現了人類早老綜合癥的癥狀， 如端粒快速縮短，毛發變白、脫落，白內障、二型糖尿病、骨質疏松，缺血性心臟 病，骨肉瘤等等。由于小鼠體細胞端粒長度在15-80kb左右，敲除端粒酶活性的 小鼠仍然需要繁殖到第4-6代(G4-G6)才表現出早老綜合癥的癥狀，進一步證實 了端粒功能異常是導致早老綜合癥的關鍵。在這一模型中，端粒酶基因被敲除，所 以該模型產生的腫瘤是ALT(Alternative?Lengthening?of?Telomeres)腫瘤(Chang， Multani?et?al.2004)。