[發明專利]歐纈草的組織培養繁殖方法

無效

• 申請號: 200910094291.4
• 申請日: 2009-04-03
• 公開（公告）號: CN101518204A
• 公開（公告）日: 2009-09-02
• 發明（設計）人: 周俊;趙友興;劉玉清;曹家駒;趙建國;徐云峰
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明植物研究所;昆明滇虹藥業有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A61K36/185;A61P25/20
• 代理公司: 云南協立專利事務所
• 代理人: 馬曉青

技術領域

本發明屬于植物組織培養繁殖技術領域，具體地，涉及敗醬科纈草屬藥用植物歐纈草(Valeriana?officinalis?L.)組織培養繁殖方法。

背景技術

歐纈草(Valeriana?officinalis?Linn.)為敗醬科纈草屬多年生草本植物，原產歐洲，國內并無野生分布。歐纈草作為國際上認定的藥用纈草在歐美使用歷史悠久并廣泛應用，其根入藥主要具有鎮靜、促進睡眠、抗抑郁和焦慮等功效，且無宿醉作用，用作鎮靜安眠(鎮靜劑)，治療輕、中度失眠與精神緊張等，先后被英、美、法、德、俄、意等22國國家標準以及歐洲植物藥治療科學合作協會(ESCOP)植物藥專冊目錄收載。歐纈草及其制劑目前在歐美市場上十分暢銷，年銷售額(達到上億美元)一直列暢銷植物藥前10名。

纈草屬全世界約250余種，我國約有28種1變種(包括栽培1種)，其中一些種雖有藥用記載，如纈草(V.pseudofficinalis?C.Y.Cheng?et?H.B.Chen)、寬葉纈草(V.fauriei)、黑水纈草(V.amurensis)、毛節纈草(V.alternifolia)、蜘蛛香(V.jatamansi)等，但非歐纈草(V.officinalis?Linn.)。本發明所用資源為歐纈草，其學名經纈草屬專家陳虎彪教授鑒定。國內纈草資源中纈草烯酸(2000年美國藥典USP24規定歐纈草原料中纈草烯酸不低于0.1％)含量遠未達到歐纈草歐美藥典的標準，從而無法進入歐美市場。

隨著社會壓力和生活節奏的加快，我國有20％至30％的國民患有不同程度的失眠，老年群體失眠率更是高達40％。目前治療失眠主要以合成藥物為主，常具有一定的副作用，如頭暈目眩、乏力等，因而尋找能促進睡眠的天然植物藥非常必要。而解決這些天然植物藥的繁殖技術及應用迫在眉睫。

迄今，現在技術中未有歐纈草(Valeriana?officinalis?Linn.)的組織培養繁殖方法的報道。

發明內容：

本發明旨在提供一種歐纈草(Valeriana?officinalis?Linn.)的組織培養繁殖方法，用歐纈草幼嫩的腋芽或頂芽作外植體，經無菌處理后，利用培養基進行外植體誘導、叢芽增殖及生根培養，經過試管苗煉苗移栽，達到組織快繁和規模化生產的目的。本發明人工繁殖的歐纈草可用于制備改善睡眠保健食品和藥物。

為了實現本發明的上述目的，本發明提供了如下的技術方案：

歐纈草(Valeriana?officinalis?L.)組織培養繁殖方法，包括用歐纈草幼嫩的腋芽和頂芽作外植體，經無菌處理后，在培養基中進行外植體誘導、叢芽增殖、生根培養、煉苗移栽。

所述無菌處理和外植體誘導是將幼嫩的頂芽或腋芽經0.1％的肥皂液侵泡8～10min，用自來水沖洗干凈，用0.1％氯化汞溶液消毒10～15min后取出，用無菌水沖洗5～8次，接種于啟動培養基MS+6-BA1.5+NAA0.2上培養；培養條件：3％蔗糖、0.65％瓊脂，PH5.，培養溫度為(25±1)℃，光照時間12h·d^-1，光照10001ux。

所述增殖培養是將啟動培養基培養獲得的叢生芽在無菌條件下去掉生長過長的葉片，切成1cm左右的單個小芽，接種在增殖培養基①MS+6-BA1.5+NAA0.2或②MS+6-BA1.0+NAA0.2或③MS+6-BA0.5+NAA0.2上進行增殖培養，培養條件：3％蔗糖、0.65％瓊脂，PH5.，培養溫度為(25±1)℃，光照時間12h·d^-1，光照10001ux。

所述生根培養是將增殖培養產生的不定芽，分成單株，轉至生根培養基①MS+IAA0.2+IBA0.2或②MS+IAA0.5+IBA0.5或③MS+IAA1.0+IBA1.0上誘導生根。

所述煉苗移栽是當不定根生長至0.5～1cm時，移至大棚中，不打開瓶蓋，在自然光照條件下煉苗5～7d，取出小苗，小心洗去根部的培養基，用1∶1000的多菌靈溶液浸泡5min后，栽于溫室中，加蓋塑料薄膜保濕，一周內保持遮光60％和適當濕度，一周后揭去薄膜。

本發明還提供了一種改善睡眠的藥物，以上述歐纈草組織培養得到的歐纈草的提取物為原料，加入可接受的藥用載體制備而得。

所述的藥物是以歐纈草組織培養得到的歐纈草為原料，用95％乙醇提取獲得歐纈草提取物，再加入可接受的藥用載體。

改善睡眠的保健品，以本發明上述歐纈草組織培養得到的歐纈草的提取物為原料，加入可接受的藥用載體制備而得。