[發明專利]一種提高煙葉質量的生物菌劑

有效

• 申請號: 200910094138.1
• 申請日: 2009-02-27
• 公開（公告）號: CN101497864A
• 公開（公告）日: 2009-08-05
• 發明（設計）人: 高家合;李梅云;晉艷;張樹鐸
• 申請（專利權）人: 云南省煙草科學研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C05G1/00;C05D1/00;C12R1/66
• 代理公司: 昆明今威專利代理有限公司
• 代理人: 楊宏珍

技術領域：

本發明涉及一種提高煙葉質量的生物菌劑，屬生物技術領域。

背景技術：

煙葉糖含量偏高、鉀含量偏低是影響云南煙葉質量的主要原因之一。降低煙葉糖含量、增加鉀含量是煙草科學研究中最受關注的領域之一。煙葉糖含量除受遺傳因素、生態因素影響外，應用特殊的施肥(施銨態氮肥、施充足的磷鉀肥)、烘烤調制(提高濕度)技術是降低煙葉糖含量的主要途徑；增施鉀肥是提高煙葉含鉀量的主要途徑。

隨著人們對吸煙與健康問題的廣泛關注及減少公害、保護環境運動的興起，煙草業如何在既能滿足消費者的需求，又能減少公害、保護環境上面臨嚴重挑戰。目前，提高煙葉質量，必須適當降低煙葉糖含量、增加含鉀量。研究開發具有實際應用價值的微生物技術來提高煙葉鉀含量、適當降低糖含量，從而提高煙葉質量，具有重要的現實意義和廣闊的應用前景。

發明內容：

本發明的主要目的在于提供一種能提高煙葉質量生物菌劑，為生產優質煙葉提供技術支持。

本發明采用的真菌是臭曲霉Aspergillus?foetidus?G01菌株，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；地址：中國北京市朝陽區北辰西路1號院；保藏日期：2009年1月8日；保藏登記入冊的編號CGMCC?NO.2851。

G01菌株屬于土壤真菌，系本發明人從大量土壤細菌菌株中篩選出來的，具有顯著提高煙葉質量的能力，經中國農業科學院中國農業微生物菌種保藏管理中心(ACCC)進行鑒定，G01菌株為臭曲霉Aspergillusfoetidus。

本發明是這樣實現的：G01菌株的試管種子培養，搖床擴大培養制備為生物制劑，將制劑應用于大田植煙土壤中，煙葉成熟調制后測定煙葉含鉀量。

本發明細菌G01菌株的培養方法(以下為重量百分比)：

1、試管種子培養

試管斜面培養基配方為：葡萄糖1％、蛋白胨0.5％、KH₂PO₄?1％、MgSO₄.7H₂O0.5％、瓊脂2％、氯霉素0.1％、虎紅鈉鹽0.03％，pH?7.0。

將G01菌株接種到試管斜面培養基上，30℃恒溫培養2天，獲得試管種子。

2、液體發酵培養

液體發酵培養基配方為：葡萄糖0.7～1％、蛋白胨0.3～0.5％、KH₂PO₄0.5～1％、MgSO₄.7H₂O?0.5％、氯霉素0.1％、虎紅鈉鹽0.03％，pH?7.0。

將試管種接種子到500m?l三角瓶液體培養基中，每瓶裝200ml，于30～32℃搖床培養，培養時間3～5天，轉速為150～200r/min，培養液下搖床后用稀釋平板計數法測定菌懸液濃度，菌濃度為每ml活菌數≥10⁷。即得具有提高煙葉含鉀量功能的生物制劑。

本發明生物制劑提高煙葉含鉀量功能試驗：

1、制備生物制劑：按前述G01菌株的培養方法制備試驗用制劑；以未接種G01菌株的液體培養基處理作為對照。

2、生物制劑對煙草處理方法

烤煙K326品種(純氮施用量7克/株，N∶P₂O₅∶K₂O＝1∶1∶3)，煙苗大田移栽后15天，將供試菌劑每株澆施100毫升，其余按優質煙生產技術常規管理，煙葉成熟后分葉位采摘按常規烘烤調制。

3、煙葉鉀含量測定方法

總糖和還原糖按《煙草及煙草制品水溶性糖的測定連續流動法》YC/T159～2002方法測定。總糖(還原糖)含量降低百分率的計算方法為：

總糖(還原糖)含量降低百分率％＝(對照處理煙葉糖含量-制劑處理煙葉糖含量)/對照處理煙葉糖含量×100

煙葉鉀含量按《煙草及煙草制品鉀的測定火焰光度法》YC/T?173～2003方法測定。煙葉鉀含量提高百分率的計算方法為：

鉀含量提高百分率％＝(制劑處理煙葉鉀含量-對照處理煙葉鉀含量)/對照處理煙葉鉀含量×100

4、試驗結果

表1?生物制劑處理煙葉糖和鉀含量測定結果

葉位：從煙株第一片腳葉往上計數編號。注：數據由云南省煙草科學研究所分析測試中心分析.