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[發明專利]非病毒載體及其制備方法與應用有效

專利信息
申請號: 200910093081.3 申請日: 2009-09-28
公開(公告)號: CN102030754A 公開(公告)日: 2011-04-27
發明(設計)人: 黃文林;張超;高詩娟 申請(專利權)人: 中國科學院微生物研究所
主分類號: C07D475/04 分類號: C07D475/04;C08G65/48;C08G81/00;A61K47/34;A61K48/00;A61P35/00;A61P9/00
代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 代理人: 關暢
地址: 100080 北*** 國省代碼: 北京;11
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摘要:
搜索關鍵詞: 病毒 載體 及其 制備 方法 應用
【權利要求書】:

1.式I所示化合物,

2.一種制備權利要求1所述化合物的方法,包括如下步驟:在惰性氣氛中,將葉酸與三乙胺混勻至完全溶解后,在避光及惰性氣氛的條件下,再加入N羥基琥珀酸胺酯和N,N′-二環己基碳二亞胺進行反應,得到權利要求1所述化合物。

3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:所述葉酸、三乙胺的摩爾比為2-2.5∶30-40,優選2.26∶36,反應溫度為25-30℃,優選28℃,反應時間為12-16小時,優選14小時;所述N羥基琥珀酸胺酯與葉酸的摩爾比為2-2.5∶2-2.5,優選2.26∶2.26,N,N′-二環己基碳二亞胺與葉酸的摩爾比為的2-2.5∶2-2.5,優選2.26∶2.4,反應時間為45-50小時,優選48小時;反應溫度為25-30℃,優選28℃;反應介質選自無水二甲基亞砜和無水N,N-二甲基甲酰胺中的至少一種。

4.式II所示化合物,

5.一種制備權利要求4所述化合物的方法,包括如下步驟:在避光及惰性氣氛的條件下,將權利要求1所述化合物與三乙胺、2-巰基乙胺鹽酸鹽進行反應,得到權利要求4所述化合物。

6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于:所述權利要求1所述化合物與2-巰基乙胺鹽酸鹽的摩爾比為0.55-0.60∶0.60-0.65,優選0.56∶0.62;所述三乙胺與2-巰基乙胺鹽酸鹽的用量比為2mL-4mL∶60mg-80mg;反應溫度為25-30℃,優選28℃,反應時間為15-20小時,優選18小時;反應介質選自無水二甲基亞砜和無水N,N-二甲基甲酰胺中的至少一種。

7.式III所示化合物,

8.一種制備權利要求7所述化合物的方法,包括如下步驟:將權利要求4所述化合物、式IV所示化合物與三乙胺進行反應,得到權利要求7所述化合物;

所述式IV化合物的分子量為3500±350Da。

9.根據權利要求8所述的方法,其特征在于:所述權利要求4所述化合物與式IV所示化合物的摩爾比為0.112-0.118∶0.055-0.060,優選0.115∶0.057;所述三乙胺與所述式IV化合物的用量比為0.01mL-0.03mL∶0.055mol-0.060mol,優選0.02mL∶0.057mol;反應溫度為30-40℃,優選35℃;反應時間為45-50小時,優選48小時;反應介質為pH值為7.2~7.4的磷酸鹽緩沖溶液;其中,所述磷酸鹽緩沖溶液中,NaCl的濃度為137mmol/L,KCl的濃度為2.7mmol/L,Na2HPO4的濃度為4.3mmol/L,KH2PO4的濃度為1.4mmol/。

10.式V所示化合物,

其中,m=145,n為小于m的正整數。

11.根據權利要求10所述的化合物,其特征在于:式V所述化合物的相對數均分子量為20600,分子量分布為1.73。

12.一種制備權利要求10或11所述化合物的方法,包括如下步驟:將權利要求7所述化合物與式VI所示化合物進行反應,得到權利要求10或11所述化合物;

式VI中,m=145,n為小于m的正整數,式VI所示化合物的相對數均分子量為25000Da。

13.根據權利要求12所述的方法,其特征在于:所述權利要求7所述化合物與式VI所示化合物的質量比為56-60∶315-325,優選59.6∶320;反應介質選自二甲基亞砜和N,N-二甲基甲酰胺中的至少一種;反應的溫度為30-40℃,優選35℃;反應的時間為6-48小時,優選48小時。

14.一種非病毒載體,是聚乙烯亞胺與權利要求10或11所述化合物共混而得的納米顆粒。

15.根據權利要求14所述的載體,其特征在于:所述納米顆粒的粒徑為70-90納米;所述聚乙烯亞胺與權利要求10所示化合物的摩爾比為10-15∶85-90;所述聚乙烯亞胺的分子量為25kDa;共混的溫度為20-30℃,共混的時間為15-20分鐘。

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