[發明專利]一種鑒定棉花黃萎病抗性的蛭石沙土無底紙缽定量蘸菌液方法

有效

• 申請號: 200910092786.3
• 申請日: 2009-09-17
• 公開（公告）號: CN102021223A
• 公開（公告）日: 2011-04-20
• 發明（設計）人: 朱荷琴;馮自力;趙麗紅;師勇強;李志芳
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院棉花研究所
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12R1/645
• 代理公司: 北京法思騰知識產權代理有限公司 11318
• 代理人: 高宇

技術領域

本發明涉及植物病理學領域，具體地，本發明涉及一種鑒定棉花黃萎病抗性的蛭石沙土無底紙缽定量蘸菌液方法。

背景技術

棉花黃萎病是世界性的棉花重要病害之一，選育抗病品種是防治棉花黃萎病最經濟有效的措施之一。資源材料和棉花品種的抗黃萎病性鑒定是抗病育種的基礎工作。目前國家棉花品種區域試驗以及各省的棉花品種區域試驗的抗黃萎病性鑒定，多采用人工病圃或自然病地進行成株期鑒定，由于棉花黃萎病從6月初開始發病，一直到8月底9月上旬達到全年發病高峰，因此鑒定周期長達150天左右。而且棉花黃萎病的發生受土壤菌量、溫度、濕度、光照等多種環境條件的影響，土壤含菌量低或遇高溫干旱年份，黃萎病發生輕，感病對照達不到鑒定標準(病情指數40.0～66.7)，造成試驗失敗。

發明內容

本發明的目的是提供一種鑒定棉花黃萎病抗性的蛭石沙土無底紙缽定量蘸菌液方法。

棉花黃萎病是一種土傳維管束病害，在大田條件下，一般在6月初棉花現蕾初期發病，7月下旬盛花期出現發病小高峰，到8月底9月初出現全年發病高峰，而在棉花的苗期一般不發病。對棉花材料或品種進行苗期鑒定，就要求對棉花進行人為傷根和接種。因此，棉花的接種時期，接種方法和接種量是苗期鑒定棉花材料和品種抗病性的關鍵環節，另外還必須考慮環境溫度、濕度和光照條件的控制及抗病和感病對照的設置等因素。

根據本發明的鑒定棉花黃萎病抗性的蛭石沙土無底紙缽定量蘸菌液方法包括以下步驟：

1)制作營養缽，將蛭石和沙土混勻，裝入紙缽中；

2)播種并培養棉苗，培育健壯整齊的棉苗是苗期抗病鑒定的最基本要求，也是保證鑒定準確的前提，利用蛭石和沙土(6∶4)，制作營養缽，與用滅菌土相比吸水性好，通透性強，與純蛭石相比，棉花出苗不帶殼，易于管理，可保證棉苗健壯整齊。

3)接種病原菌，在棉苗生長至一片真葉平展時，接種棉花黃萎病菌孢子懸浮液，其中接種濃度為1～5×10⁶個孢子/ml、優選5×10⁶個孢子/ml，每株棉苗接種2～3mL、優選2mL孢子懸浮液。苗期鑒定中適時適量接種是關鍵技術之一，棉苗一片真葉平展是最適宜的接種時期，試驗中要時常觀察，不可錯過。接菌濃度為1×10⁶個孢子/ml～5×10⁶個孢子/ml，每缽接種10ml孢子懸浮液，播種后37天(接菌后20天)，感病對照均達到鑒定要求，分別為57.0和59.3，感病對照矯正到50，豫棉21的相對病指為25.5和23.5(人工病圃鑒定結果為23.9)。接菌濃度為1×10⁷時，播種后37天豫棉21的相對病指為31.1，與人工病圃相比，相對病指偏高，抗耐品種之間的差異縮小，掩蓋了品種的抗病性。因此采用1～5×10⁶個孢子/ml的接種濃度，每缽接種10ml，發病快，抗感對照差異明顯(見表1)。在鑒定試驗中，要設置合適的抗病和感病對照，抗病對照和感病對照要差異明顯，抗病性和感病性穩定。在以往的人工病圃鑒定中，多年采用耐病品種豫棉21為抗病對照、冀棉11為感病對照，在苗期鑒定中，同樣以豫棉21和冀棉11為抗病和感病對照，兩品種抗感差異明顯，抗病和感病性狀穩定，是較為理想的對照品種。棉花苗期抗黃萎病性鑒定對溫度的要求較為嚴格，要求日平均溫度26℃左右，適宜發病的溫度為20℃～32℃。鑒定要求有相對較高的濕度，土壤相對濕度為60％以上較為合適，并且要均勻一致。試驗還要求有良好的光照，在春秋季節，日光溫室的光照一般均可達到要求。

表1：不同接菌濃度的發病情況

4)評價棉花黃萎病抗性，在適宜的條件下，一般接菌后7天開始發病，15天普遍發病。試驗要求感病對照病情指數達到50左右。一般在接菌后20天左右即可達到鑒定要求，可以進行分級調查，如感病對照病情指數不到50或超過50(40.0～66.7)，可應用相對病情指數，將感病對照矯正到50，以便不同批次的結果進行比較。

根據本發明的方法，優選所述蛭石和沙土以6∶4體積比混合。

根據本發明的方法具有以下特點：

1、棉花出苗好，根系發育完整。采用蛭石沙土制作營養缽，播種前，從營養缽底部灌入一定量的水，營養缽吸水迅速均勻，有利于棉花出苗整齊一致。苗期鑒定中，需要在棉苗一片針葉平展時從根部接種黃萎病菌的孢子懸浮液，要求棉苗的根系發育良好，毛細根均勻地伸出營養缽。蛭石沙土無底紙缽定量蘸菌液法采用蛭石沙土制作的營養缽，通透性好，棉苗根系發育好，有利于棉苗充分吸取病原菌的孢子懸浮液。