[發明專利]一種同時測定飼用酸化劑中多種有機酸含量的方法

有效

• 申請號: 200910092694.5
• 申請日: 2009-09-15
• 公開（公告）號: CN101650347A
• 公開（公告）日: 2010-02-17
• 發明（設計）人: 蘆光宏;陳紹莉;魏升平;朱森陽
• 申請（專利權）人: 安徽泰格生物技術股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司
• 代理人: 王朋飛

技術領域

本發明涉及一種同時測定飼用酸化劑中多種有機酸含量的方法。

背景技術

酸化劑是非營養性飼料添加劑的一種，能提高飼料酸度，抑制有 害菌的生長，改善動物消化道環境，提高動物的生長性能。酸化劑主 要包括單一酸化劑和復合酸化劑，單一酸化劑分為有機酸和無機酸。 目前使用的無機酸化劑主要是磷酸；有機酸化劑主要有檸檬酸、延胡 索酸(富馬酸)、乳酸、丙酸、蘋果酸、山梨酸、甲酸、乙酸等。復合 酸化劑是將兩種或以上的單一酸化劑按照一定的比例復合而成。由于 受檢驗設備和技術上的困擾，大多數用戶基本上不檢測酸化劑中各成 分含量，而生產廠家也只是根據各有機酸投料所占比例標示其含量。 根據文獻報導，酸化劑中各有機酸成分的含量檢測方法是利用其理化 性質，分別進行樣品處理、檢測。發明本檢驗方法之前，依據報導對 各種酸檢驗方法進行了研究，結果證明其方法是可行的，但過程復雜， 如乳酸含量檢測通常采用方法是：在銅離子的催化下，與濃硫酸作用 生成乙醛，乙醛能與對羥基聯苯作用生成在565nm處有特征吸收的 紫紅色物質，在一定范圍內，乳酸濃度與其在波長為565nm的吸光 度呈線性關系，通過測定565nm處樣品的吸光度來測定乳酸的含量。 該方法測乳酸含量檢測周期長，對濃硫酸氧化乳酸過程的實驗者操作 技能要求高，檢測結果的重現性不高，偏差較大。檸檬酸含量國標檢 測方法是利用其與重氮化的磺胺酸的特效反應，于420nm波長處比 色測定。該法測檸檬酸含量同上述測乳酸含量方法一樣，實驗操作必 須做到標準檸檬酸溶液和樣品溶液分別與試劑進行充分、完全的顯色 反應，方能達到標準曲線線性要求和試樣分析結果準確、精密。甲酸 含量國標檢測采用其與碳酸鈣反應，生成甲酸鈣，甲酸鈣定量將氯化 汞還原為氯化亞汞，根據氯化亞汞的質量計算甲酸含量。該法測甲酸 含量所用試劑毒性大，另外沉淀完全與否和沉淀過濾、洗滌過程中的 損失，致檢測方法相對誤差較大。丙酸國標通常采用氣相色譜法測含 量，該法受檢測設備、檢驗成本的限制，難以在實際生產、驗收中使 用。

發明內容

本發明的目的是提供一種同時分析飼用酸化劑中甲酸、乳酸、檸 檬酸、富馬酸和丙酸等五種有機酸含量的方法，特別是提供一種快速、 準確和精密度高的測定方法。

為達到上述目的，本發明的技術方案提供一種同時測定飼用酸化 劑中多種有機酸含量的方法，包括以下步驟：

(1)分別配制甲酸、乳酸、檸檬酸、富馬酸和丙酸的標準儲備 溶液，然后混合定容配制成混合標準溶液；

(2)取待測的飼用酸化劑試樣稀釋500-2000倍；

(3)稀釋后的樣液過濾后取5-20μL注入液相色譜儀，在流動相 的流速為0.6-1.0mL/min的條件下記錄210nm波長下的色譜圖；另取 等量的混合標準溶液同上述方法測定，按外標法以峰面積計算試樣中 有機酸的含量。

上述方法，其中所述步驟(1)中各種有機酸的標準溶液的濃度 可以按照待測的市售飼用酸化劑中的有機酸的含量為標準來設定。對 于現有的常用的飼用酸化劑，混合標準溶液中的各種有機酸的濃度優 選為：甲酸的濃度為0.2mg/mL；乳酸的濃度為1.0mg/mL；檸檬酸 的濃度為1.0mg/mL；富馬酸的濃度為0.05mg/mL；丙酸的濃度為0.5 mg/mL。

上述方法，所述步驟(2)中試樣的稀釋度主要依試樣的有機酸 含量和標準溶液的濃度來確定，可在500-2000倍之間選擇，對于現 有的常用的飼用酸化劑，優選為1000倍。

上述方法，其中所述步驟(3)中的進樣量優選為10μL。

上述方法，其中所述步驟(3)中流動相優選為0.1mol/L的磷酸 二氫銨溶液。

上述方法，其中所述步驟(3)中流動相的流速優選為1.0mL/min。

上述技術方案具有如下優點：

1、在同一色譜條件下，僅需進一次樣品，即能同時得到甲酸、 乳酸、檸檬酸、富馬酸和丙酸含量分析結果。建立了一種簡單、快速、 準確度高的檢測方法。