[發明專利]線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶測定試劑盒

無效

• 申請號: 200910092437.1
• 申請日: 2009-09-08
• 公開（公告）號: CN102010890A
• 公開（公告）日: 2011-04-13
• 發明（設計）人: 徐士峰;楊玉軍
• 申請（專利權）人: 北京迪邁醫學診斷技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/52
• 分類號: C12Q1/52;C12Q1/37;C12Q1/32
• 代理公司: 北京市德權律師事務所 11302
• 代理人: 王建國

技術領域

本發明涉及一種線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶測定試劑盒。

背景技術

天門冬氨酸氨基轉移酶存在兩種同工酶，即線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶和細胞漿天門冬氨酸氨基轉移酶。線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶和細胞漿天門冬氨酸氨基轉移酶是1950被Hird和Rowsell發現并在1960年被Fleisher等用電泳確證的，實驗表明：在堿性溶液中，線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶向陰極移動，而細胞漿天門冬氨酸氨基轉移酶向陽極移動。

線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶和細胞漿天門冬氨酸氨基轉移酶廣泛存在于人體各種組織細胞中，以肝、心細胞含量最為豐富。其中線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶存在于線粒體內，而細胞漿天門冬氨酸氨基轉移酶則存在于細胞漿內，屬細胞內同工酶。細胞作為一個整體，其中的線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶含量占80％，而細胞漿天門冬氨酸氨基轉移酶含量只占20％。

線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶和細胞漿天門冬氨酸氨基轉移酶這兩種同工酶都是由兩條相同的多肽亞單位所組成，每個亞單位的相對分子量是46,000，整個酶的分子量是92,000。這兩種同工酶在相應的基因組成上有差異，在氨基酸組成和免疫特性上不同。在細胞輕度損害時，主要是細胞漿內的細胞漿天門冬氨酸氨基轉移酶透過細胞膜釋放入血，而線粒體內的線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶有兩層線粒體膜的保護，不易釋放入血。線粒體內的線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶濃度一般比血清中的濃度高數千倍，當細胞炎癥、壞死等使細胞嚴重損害時，線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶迅速釋放入血，因此測定線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶作為判定肝臟、心臟的損害程度及預后的評價指標，對疾病的診斷、治療、療效及護理有重要價值。

線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶與CK、CK-MB及ALT相比，CK、CK-MB及ALT均為細胞質酶，當缺血、缺氧使細胞通透性改變時，即可釋放入血，其增高不完全說明細胞壞死損傷，而此時線粒體中的線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶不釋放入血，故同時測定細胞不同部位的酶可鑒別細胞損傷的程度。以線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶為細胞壞死指示酶，對肝細胞壞死的診斷有重要應用價值。如急性肝炎時，肝細胞內的線粒子體嚴重破壞，線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶升高。當肝細胞不再繼續破壞時迅速下降，表示預后較好；反之，說明肝細胞仍繼續壞死，疾病可能趨向慢性化。再如線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶在乙醇性肝炎時明顯增高，說明該病為肝細胞壞死性損傷；線粒體AST與總AST的比值有助于鑒別診斷酒精性肝炎與其他肝病。肝臟手術前測定血清線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶，對手術的成功及預后有重要意義，對肝臟手術術前指征的判定有重要應用價值。

以線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶為細胞壞死指示酶，對急性心肌梗死的診斷也具有重要應用價值。線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶活性峰與總CK、CK-MB或細胞漿天門冬氨酸氨基轉移酶的活性峰略相關，因此，可疑急性心肌梗死患者測定線粒體AST，能提供這類患者通常測定的酶及同工酶所不能提供的新信息。在缺氧階段細胞膜通透性改變，CK酶和其他細胞漿酶就從細胞釋放了，即使此時尚無細胞壞死。這些酶釋放不是細胞壞死的標志。另一方面，CK和其他細胞漿酶反映心肌組織損害的面積，線粒體AST的釋放更多地反映亞細胞壞死損傷的嚴重程度。心臟手術前測定血清線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶，對手術的成功及預后有重要意義，對心臟手術術前指征的判定有重要應用價值。

目前，血清中線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶的測定主要有電泳、層析法以及免疫學方法包括酶免、放免，免疫抑制法等。電泳、層析法測定時費時，難于自動化測定，不能用于臨床大規模標本的應用。由于上述方法學的缺陷導致線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶的測試長期不能在臨床上的到廣泛開展，因而肝臟和心臟等臟器損傷的嚴重程度缺乏直接的指標。

發明內容

本發明的目的是提供一種不受細胞漿天門冬氨酸氨基轉移酶的干擾，結果準確的線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶測定試劑盒，以彌補上述缺陷。

本發明的所提供的線粒體天門冬氨酸氨基轉移酶測定試劑盒，含有試劑1和試劑2，所述試劑1含有天門冬氨酸蛋白酶、α-酮戊二酸、L-天門冬氨酸、蘋果酸脫氫酶、乳酸脫氫酶、防腐劑和PEG6000；所述試劑2含有NADH、防腐劑和EDTA·2Na。