[發明專利]一種抗肉毒毒素底物肽SubA的IgY抗體，其制備方法和用途

無效

• 申請號: 200910092287.4
• 申請日: 2009-09-09
• 公開（公告）號: CN101648997A
• 公開（公告）日: 2010-02-17
• 發明（設計）人: 王慧;史晶;劉昊;侯曉軍;王琴;李濤
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院微生物流行病研究所
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C07K16/02;C07K1/14;C12P21/06;G01N33/53;G01N33/543;G01N33/569
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1.一種抗肉毒毒素底物肽的IgY抗體，其特征在于特異識別肉毒毒素底物肽SubA，該底物肽SubA的氨基酸序列如序列表中序列1所示。

2.權利要求1所述抗肉毒毒素底物肽的IgY抗體的衍生物，是IgY抗體的蛋白酶消化產物，其特征在于保留IgY抗體的抗原結合活性。

3.權利要求1所述抗肉毒毒素底物肽的IgY抗體，其特征在于通過將肉毒毒素底物肽抗原免疫雞，然后從其蛋黃中提取卵黃免疫球蛋白，進一步純化或蛋白酶消化進行制備，該IgY抗體分子量為180,000，制備純度大于85％。

4.權利要求1所述抗肉毒毒素底物肽IgY抗體的制備方法，包括如下步驟：

(1)重組制備肉毒毒素底物肽抗原(底物肽SubA或其修飾體)；

(2)應用肉毒毒素底物肽抗原多次加強免疫產蛋雞；

(3)收集雞蛋，分離出蛋黃，提取卵黃免疫球蛋白；

(4)純化IgY抗體或進一步蛋白酶消化加工。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其中制備肉毒毒素底物肽抗原采用化學合成或基因工程重組表達方法。

6.根據權利要求4所述的制備方法，其中提取卵黃免疫球蛋白采用水稀釋法、鹽析或PEG法。

7.根據權利要求4所述的制備方法，其中純化IgY抗體采用DEAE色譜、凝膠過濾或親和層析分離純化方法。

8.權利要求1所述抗肉毒毒素底物肽的IgY抗體或權利要求2所述抗肉毒毒素底物肽的IgY抗體的衍生物在制備檢測A型肉毒毒素以及產A型肉毒毒素病原菌的診斷試劑中的用途。

9.根據權利要求8所述用途，其中肉毒毒素來自產生肉毒毒素的微生物：肉毒梭菌。