[發明專利]表達谷氨酰胺轉胺酶的重組菌及其應用有效
| 申請號: | 200910091763.0 | 申請日: | 2009-08-27 |
| 公開(公告)號: | CN101633897A | 公開(公告)日: | 2010-01-27 |
| 發明(設計)人: | 李寅;朱泰承;游麗金 | 申請(專利權)人: | 中國科學院微生物研究所 |
| 主分類號: | C12N1/19 | 分類號: | C12N1/19;C12N9/10;A23L1/28;C12R1/84 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 | 代理人: | 關 暢;任鳳華 |
| 地址: | 100101北京市朝陽區北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 表達 谷氨酰胺 轉胺酶 重組 及其 應用 | ||
1.一種重組菌,是含有谷氨酰胺轉胺酶前體基因和枯草桿菌蛋白酶類水解酶基 因SAM-P45的重組甲醇營養型酵母菌;
所述甲醇營養型酵母菌是巴斯德畢赤酵母菌;所述巴斯德畢赤酵母菌是巴斯德畢 赤酵母菌GS115;
所述谷氨酰胺轉胺酶前體基因的編碼序列如GenBank號為AF531437的自5’端的 第671-1798位所示。
2.如權利要求1所述的重組菌,其特征在于:所述枯草桿菌蛋白酶類水解酶基 因SAM-P45的編碼序列是GenBank號為D83672的自5’端的第14-3322位所示。
3.如權利要求1或2所述的重組菌,其特征在于:所述枯草桿菌蛋白酶類水解 酶基因SAM-P45是通過重組表達載體A導入甲醇營養型酵母菌中,得到重組甲醇營養 型酵母菌A;
所述重組表達載體A是將所述枯草桿菌蛋白酶類水解酶基因SAM-P45插入pPICZ α的多克隆位點得到的重組表達載體。
4.如權利要求3所述的重組菌,其特征在于:所述谷氨酰胺轉胺酶前體基因是 通過重組表達載體B導入重組甲醇營養型酵母菌A中,得到權利要求1所述的重組菌;
所述重組表達載體B是將所述谷氨酰胺轉胺酶前體基因插入載體pAO815alpha的 多克隆位點得到的重組表達載體;
所述載體pAO815alpha是將pPICZα用SacI和EcoRI雙酶切得到的小片段與經 同樣雙酶切過的pAO815連接得到的重組載體。
5.如權利要求1所述的重組菌,其特征在于:所述重組菌為巴斯德畢赤酵母 (Pichia?pastoris)GSMTGB?CGMCC?№.3249。
6.權利要求1-5任一所述的重組菌在產谷氨酰胺轉胺酶中的應用。
7.如權利要求6所述的應用,其特征在于:所述應用是指將權利要求1-5任一 所述的重組菌在BMMY培養基中發酵培養;所述發酵培養條件是28-30℃,pH為4-5, 轉速為200r/min。
8.權利要求1-5任一所述的重組菌在食品加工中的應用。
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