[發(fā)明專利]一種白菜品種鑒定的方法及其專用試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910090409.6 | 申請日： | 2009-07-31 |
| 公開（公告）號： | CN101619358A | 公開（公告）日： | 2010-01-06 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李麗;鄭曉鷹;宋順華;吳萍;馬連平;張風(fēng)蘭;李秀清;邢寶田 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京市農(nóng)林科學(xué)院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;G01N27/447 |
| 代理公司： | 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人： | 關(guān) 暢;任鳳華 |
| 地址： | 100097北京市海淀區(qū)*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 白菜 品種 鑒定 方法 及其 專用 試劑盒 | ||
1.一種白菜品種鑒定的試劑盒，包括下述引物組合：
1)引物組合I：由核苷酸序列分別為序列表序列1和序列表中序列2的引物對、核苷酸序列分別為序列表序列3和序列表中序列4的引物對和核苷酸序列分別為序列表序列5和序列表中序列6的引物對組成；
2)引物組合II：由核苷酸序列分別為序列表序列7和序列表中序列8的引物對、核苷酸序列分別為序列表序列9和序列表中序列10的引物對和核苷酸序列分別為序列表序列11和序列表中序列12的引物對組成；
3)引物組合III：由核苷酸序列分別為序列表序列13和序列表中序列14的引物對、核苷酸序列分別為序列表序列15和序列表中序列16的引物對和核苷酸序列分別為序列表序列17和序列表中序列18的引物對組成；
4)引物組合IV：核苷酸序列分別為序列表序列19和序列表中序列20的引物對、核苷酸序列分別為序列表序列21和序列表中序列22的引物對和核苷酸序列分別為序列表序列23和序列表中序列24的引物對組成；
5)引物組合V：由核苷酸序列分別為序列表序列25和序列表中序列26的引物對、核苷酸序列分別為序列表序列27和序列表中序列28的引物對和核苷酸序列分別為序列表序列29和序列表中序列30的引物對組成；
6)引物組合VI：由核苷酸序列分別為序列表序列31和序列表中序列32的引物對、核苷酸序列分別為序列表序列33和序列表中序列34的引物對和核苷酸序列分別為序列表序列35和序列表中序列36的引物對組成。
2.一種白菜品種鑒定的方法，是以待測白菜的DNA為模板，以權(quán)利要求1所述的試劑盒的引物組合I-VI分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增，檢測多態(tài)性片段大小，跟已知白菜品種用該引物組合進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到的多態(tài)性片段大小相對比，若他們擴(kuò)增得到的片段大小均一致，則該待測白菜的品種與已知白菜品種是同一個(gè)品種；如果該待測白菜樣品擴(kuò)增得到的多態(tài)性片段與已知白菜品種擴(kuò)增得到的多態(tài)性片段不一致，則該待測品種白菜不是該已知白菜品種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)程序?yàn)椋合?2℃?3min，94℃?2min；然后在94℃?1min，68℃-58℃?1min，72℃?1min15s的條件下，進(jìn)行20個(gè)迫降循環(huán)，其中，68℃-58℃逐級降低，每完成擴(kuò)增的兩個(gè)循環(huán)，溫度降低一度；再在94℃?1min，58℃?1min，72℃?1min15s條件下進(jìn)行20個(gè)循環(huán)；最后于72℃?7min，4℃保存。
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