[發明專利]抑制胸腺素β4基因表達的RNA及其應用

有效

• 申請號: 200910088568.2
• 申請日: 2009-07-06
• 公開（公告）號: CN101591657A
• 公開（公告）日: 2009-12-02
• 發明（設計）人: 秦澤蓮;黃似建;劉暢
• 申請（專利權）人: 北京大學第三醫院
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/00;C12N7/01;A61K48/00;A61P35/00;C12R1/93
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 關 暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及一種抑制胸腺素β₄基因表達的RNA及其應用。

背景技術

1981年，Tβ₄被從胸腺提取物中利用凝膠層析法分離出來。研究發現，Tβ₄是 由43個氨基酸殘基組成的疏水多肽，分子量為4964Da，等電點5.1，在哺乳動物 中高度保守。化學構象研究表明，Tβ₄是以單鏈形式存在及發揮作用，其第31-43 殘基和第18-30殘基間是一內部重復區域，有6個氨基酸相同。雖然存在第4-12 殘基和第32-40殘基兩個高度螺旋區，但是Tβ₄沒有β轉角形成。1991年，來自費 城賓夕凡尼亞大學醫學院的Daniel?Safer等在研究肌動蛋白單體(G-actin)是如 何聚合形成纖維肌動蛋白(F-actin)的過程中偶然發現Tβ₄與肌動蛋白單體結合， 從而阻斷纖維肌動蛋白的形成。后來的研究發現在哺乳動物中編碼Tβ₄的基因位于 X染色體上。盡管它最初是從胸腺中被分離，但是后來證實機體眾多組織中都有它 的蹤跡，其中含量最高的分別是脾臟、胸腺、肺和腹膜巨噬細胞，其次是腦、肝、 腎臟、睪丸、心臟，甚至非網狀內皮系統的細胞如成肌細胞、成纖維細胞等也能合 成Tβ₄。在循環系統中，白細胞、血小板等血細胞都存在Tβ₄，紅細胞缺乏。在血 小板和白細胞中，其是含量最高的肌動蛋白阻斷蛋白，濃度可達0.3mM。在溶液中， Tβ₄對MgATP-actin的親和力達0.5-2μM，是其對MgADP-actin的50倍。淋巴 組織存在不同形式的Tβ₄mRNA，提示Tβ₄亞型或是剪切體在淋巴細胞的發育和功 能的形成中發揮作用。最初Julian?D.WATTS等通過顯微注射發現Tβ₄是胞漿蛋白 而非核蛋白，2004年Thomas?Huff等利用Oregon?Green?cadaverine和 transglutaminase標記Tβ₄對Hela細胞體外顯微注射，驚奇的發現Tβ₄在核內富 集，而在細胞漿中只是散在存在，推測Tβ₄很有可能是通過某種主動運輸進入核內。 除了Tβ₄外，在核內還含有其他幾種肌動蛋白結合蛋白和數量可觀的肌動蛋白單 體，但是功能未知。鑒于核內存在大量的Tβ₄，有理由推測Tβ₄很有可能作為一個 轉錄因子發揮作用。同時研究發現，Tβ₄cDNA中缺少信號肽，盡管體內也存在一些 沒有信號肽的分泌蛋白如白細胞介素1(IL-1)、內皮生長因子等，但大家還是傾 向認為Tβ₄不大可能是外分泌蛋白，而可能是某些細胞基本功能所必需。

Tβ₄具有很多重要功能：(1)Tβ₄在維持細胞骨架的動態平衡中起著重要作用； (2)研究表明，Tβ₄的過度表達和惡性腫瘤轉移有一定的關系；(3)Tβ₄對腫瘤細 胞的增殖也有一定的影響；(4)血管形成參與了機體的眾多生理過程，研究發現T β₄具有促進血管形成的作用；(5)胸腺素β4的裂解片段(N-乙酰基-絲氨酰-天門 冬酰-賴氨酰-脯氨酰，AcSDKP，N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline)是 一種生理性造血系統生長抑制因子；(6)Tβ₄是在創傷愈合與損傷組織的再生和重 建中發揮重要作用；(7)Tβ₄被認為有促進細胞遷移，抗炎癥反應，殺滅細菌和化 學保護等特性，并且可以刺激層粘連蛋白5的合成；(8)在絕大多數的哺乳動物細胞 中，Tβ₄是主要的肌動蛋白調節分子，可促進細胞中所有F-肌動蛋白的解離，能作 為肌動蛋白結合的競爭性抑制蛋白和肌動蛋白解聚的協同蛋白來同時調節肌動蛋 白的多聚化和解聚，在組織的再生、重塑、創傷組織的愈合修復中發揮重要作用； (9)β₄在機體的免疫功能的維持方面也發揮著重要的作用。

發明內容

本發明的目的是提供一種抑制胸腺素β₄基因表達的RNA及其應用。