[發明專利]一種使用聚酰胺氫鍵吸附色譜分離純化胸腺五肽的方法無效
| 申請號： | 200910087566.1 | 申請日： | 2009-06-30 |
| 公開（公告）號： | CN101643498A | 公開（公告）日： | 2010-02-10 |
| 發明（設計）人： | 孟桂鳳;邢思亮 | 申請（專利權）人： | 北京康銘優盛生化技術有限公司 |
| 主分類號： | C07K7/06 | 分類號： | C07K7/06;C07K1/22 |
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| 地址： | 100098北京市海*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 使用 聚酰胺 氫鍵 吸附 色譜 分離 純化 胸腺 方法 | ||
【權利要求書】：
1、一種使用聚酰胺色譜法分離胸腺五肽的方法，利用聚酰胺介質與胸腺五肽及其混合物中雜質之間吸附作用的差異，對不同來源的胸腺五肽進行純化。
2、根據權利要求1所述使的使用聚酰胺色譜分離胸腺五肽的方法，其包括如下的步驟：
1)胸腺五肽溶液的制備：稱取10mg固相合成的胸腺五肽粗品，將其溶于1ml水中配制成10mg/ml的胸腺五肽溶液，離心去除顆粒物；
2)取300目聚酰胺粉末，加入95％乙醇于室溫110轉/分鐘振蕩洗滌40-50分鐘，傾出95％乙醇，用水洗至無醇味，再分別用5％氫氧化鈉溶液及30％乙酸溶液按相同方法洗滌，最后用20％乙醇洗滌，裝柱平衡至初始流動相，采用干法或濕法裝填成柱；
3)聚酰胺介質濕法裝柱，層析柱內徑16mm，裝填高度250mm，接入Akta?Prime?Plus層析系統，壓力限2.5MPa，層析柱用流動相平衡2個柱床體積；
4)步驟1)制備好的胸腺五肽溶液，通過自動進樣閥進樣1ml；
5)等度洗脫，流速為0.8ml/min，紫外檢測器280nm監測，收集洗脫峰；
6)聚酰胺色譜分離胸腺五肽的譜圖如圖1所示，分別收集各個洗脫峰，凍干后重新溶解，經RP-HPLC(C18柱)檢測，其中所標示的峰為聚酰胺色譜峰，其純度大于95％，收率大于90％。
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