[發(fā)明專利]一種高比活木聚糖酶XYN11F63及其基因和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910086160.1
• 申請日: 2009-06-11
• 公開（公告）號(hào): CN101838636A
• 公開（公告）日: 2010-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 項(xiàng)有煒;石鵬君;王娟娟;張慧君
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇奕農(nóng)生物工程有限公司
• 主分類號(hào): C12N9/42
• 分類號(hào): C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;A23K1/165;C12P19/14;C12P19/02;C12R1/80;C12R1/225;C12R1/07;C12R1/19
• 代理公司: 北京法思騰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11318
• 代理人: 高宇

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及一種高比活木聚糖酶XYN11F63及其基因、包含該基因的重組載體和應(yīng)用。

背景技術(shù)

木聚糖(xylan)是植物細(xì)胞壁半纖維素的主要成分，它是自然界中含量僅次于纖維素的第二豐富的多聚糖，幾乎占地球可更新有機(jī)碳含量的三分之一(Collins?et?al.FEMS?Microbiology?Reviews.2005，29：3-23.)。長期以來富含木聚糖的農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物如玉米芯、秸稈、甘蔗渣等難以得到有效的利用。與此同時(shí)在造紙制漿過程中富含木聚糖和氯化物的工業(yè)廢料往往直接排入水體，導(dǎo)致水質(zhì)富營養(yǎng)化等水體污染從而嚴(yán)重破壞生態(tài)環(huán)境(Polizeli?et?al.Applied?Microbiology?and?Biotechnology.2005，67：577-591.)。木聚糖酶是可將木聚糖降解成低聚糖和木糖的一類酶的總稱，在造紙、飼料、食品、紡織、能源科學(xué)和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域上都有著廣泛的應(yīng)用前景。

據(jù)報(bào)道各種微生物如細(xì)菌和真菌等都能產(chǎn)生木聚糖酶。絲狀真菌因其易于培養(yǎng)、分泌表達(dá)以及具有高木聚糖酶生產(chǎn)能力而成為木聚糖酶的理想來源(Tanaka?et?al.Journal?of?Bioscience?and?Bioengineering，2005，100：623-630.)。目前已有一些青霉來源的木聚糖酶基因已經(jīng)得到克隆并實(shí)現(xiàn)了異源表達(dá)。包括來源于Penicillium?citrium?XynA(Tanaka?et?al.Journal?of?Bioscience?and?Bioengineering，2005，100：623-630.)，Penicillium?funiculosum?XYNC(Fumiss?et?al.BBA-Proteins?and?Proteomics.2002，1598：24-29.)，Penicillium?sp.strain?40?XynA(Kimura?et?al.Bioscience，Biotechnology?and?Biochemistry.2000，64：1230-1237.)，Penicillium?purpurogenum?XynB?(Diaz?et?al.Gene.1997，187：247-251.)，and?Penicillium?janthinellum?NCIM(Milagres?and?Prade，Enzyme?and?Microbial?Technology.199416：627-632.)。

盡管如此，真菌來源的木聚糖酶因生產(chǎn)成本較高使其應(yīng)用受到限制。因此，獲得新型具有優(yōu)良特性木聚糖酶的研究仍具有重大意義。克隆和分離具有高比活的木聚糖酶可以更好的應(yīng)用于飼料、食品和造紙工業(yè)，而且可以降低生產(chǎn)成本，都是木聚糖酶應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)所必需的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種能高效應(yīng)用的高比活木聚糖酶。

本發(fā)明的再一目的是提供編碼上述高比活木聚糖酶的基因。

本發(fā)明的另一目的是提供包含上述基因的重組載體。

本發(fā)明的另一目的是提供包含上述基因的重組菌株。

本發(fā)明的另一目的是提供一種制備上述高比活木聚糖酶的基因工程方法。

本發(fā)明的另一目的提供上述高比活木聚糖酶的應(yīng)用。

本發(fā)明從青霉(Penicillium?sp.F63)中分離得到一種新的高比活木聚糖酶XYN11F63，該菌種保存于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(北京市朝陽區(qū)大屯路，中國科學(xué)院微生物研究所，100101)，其保藏號(hào)為：CGMCC?No.1669，保藏日期：2006年4月5號(hào)，并且在申請?zhí)枮?00610080455.4、申請日為2006年5月16日的專利申請文件中。

本發(fā)明提供了一種高比活木聚糖酶XYN11F63，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

SEQ?ID?NO.1：

MVSFSNLFMAACAAVTAFALPNELDKRALTTSKQGTSDGYFYSFWTNGGGSVSY

ENGAAGQYSVTWKNCDSFTSGKGWATGSARNIKFSGSFKPSGNAYLAVYGWTTS

PLVEYYIMESYGEYNPGSSMTFKGTVTSDGSVYDIYTHKQVNQPSIVADSSTFDQY

WSIRRNKRSSGTVTTANHFNAWSKLGMGMGSHGYQIVSTEGYKSSGSSSITVS