[發明專利]核酸適體及其衍生物的新用途

有效

• 申請號: 200910083080.0
• 申請日: 2009-04-28
• 公開（公告）號: CN101537189A
• 公開（公告）日: 2009-09-23
• 發明（設計）人: 譚蔚泓;上官棣華
• 申請（專利權）人: 譚蔚泓
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61P35/00;A61P35/02;A61P31/00;A61P29/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 關 暢

技術領域

本發明涉及核酸適體及其衍生物的新用途。?

背景技術

傳統的腫瘤化療藥物由于對腫瘤細胞的特異性不強，往往在殺死腫瘤細胞的同時也殺傷正常細胞，導致強的毒副作用。腫瘤細胞靶向給藥是提高腫瘤治療效果減少毒副作用的有效途徑。將藥物偶聯于腫瘤細胞特異性配基是靶向給藥的主要方法。例如將藥物共價結合于細胞表面腫瘤標志物的單克隆抗體上，這些偶聯藥物的單抗能選擇性結合腫瘤組織，從而提高抗腫瘤藥物的效果，減少毒副作用。將多個不同作用機理的靶向治療藥物合用可得到更好的治療效果。很多這類藥物在臨床前的試驗中均取得了很好的效果，目前正在進行相關的臨床實驗(Carter，P.J.；Senter，P.D.Cancer?J.2008，14，154-169.Chari，R.V.J.Acc.Chem.Res.2008，41，98-107.)。例如人源化的CD33抗體-加里剎霉素偶聯物Mylotarg，已經被批準用于急性骨髓系白血病(AML)的治療。用于藥物靶向輸送的抗體來源于動物或融合的單克隆細胞，是自然的產物，其制備繁瑣、穩定性差、分子量大、易引起免疫反應以及難以進行化學修飾和改造等，因此導致抗體偶聯物穩定性差，成本高，限制了其廣泛應用。尋找新的特異性識別分子取代抗體是靶向藥物治療的一個重要發展方向。?

近年來一類新型的識別分子-核酸適體(Aptamer，適配體，適配子)以其優越的識別特性逐漸得到人們的重視。核酸適體是一段單鏈核酸分子(包括DNA、RNA、修飾后的核酸分子)。它們通過分子內堿基堆積、疏水相互作用、氫鍵和靜電相互作用折疊形成獨特的三維空間結構，從而與靶分子特異性結合(Breaker?R?R，Nature2004，432：838-845)。核酸適體與靶分子結合的親和力與特異性與單克隆抗體相似，甚至更強。與抗體相比，核酸適體具有較低的分子量(15-50?bases；4-15kD)、快速組織通透性、沒有免疫源性和毒性。核酸適體一旦篩選出來，就可以通過自動化的固相化學合成來制備，無需免疫動物或細胞培養的過程以及后續繁瑣的分離純化過程，價格大大降低。核酸適體很容易進行結構改造并標記上各種分子，如放射性元素、熒光染料等(Nutiu?R?&?Li?Y，Angew?Chem?Int?Ed?Engl?2005，44：1061-1065；?Liu，J.W.&?Lu，Y.Angew?Chem?Int?Ed?Engl?2006，45：90-94)。核酸適體穩定性高，可以可逆的變性與復性，可在常溫下保存和運輸。?

發明內容

本發明的目的是提供核酸適體及其衍生物的新用途。?

本發明提供了核酸適體和/或核酸適體衍生物在制備靶向藥物中的應用。?

所述核酸適體衍生物可為如下a)、b)或c)：?

a)將核酸適體的骨架部分或全部改造為硫代磷酸酯骨架或對部分或全部骨架上的糖環進行2’-F和2’-NH₂修飾等得到的核酸適體衍生物；?

b)將核酸適體部分或全部改造為肽核酸得到的核酸適體衍生物；?

c)將核酸適體中的一個以上核苷酸替換為鎖核酸(Locked?Nucleic?Acid，LNA)和/或連接分子得到的核酸適體衍生物；所述連接分子為一個以上的六聚乙二醇-1-磷酸。?

六聚乙二醇-1-磷酸的結構式如式(I)：?

式(I)。?

如式(I)所示，六聚乙二醇-1-磷酸的骨架為6個乙二醇的聚合物，骨架一端的氧連接一個帶負電的磷酸基團。用六聚乙二醇-1-磷酸替代核酸適體中的核苷酸時，通過骨架兩端的氧與兩端的核苷酸連接。?

所述核酸適體為可與疾病相關分子特異結合的一段單鏈核酸分子或經修飾的核酸分子。?

所述靶向藥物可為治療腫瘤的藥物、治療感染的藥物或治療炎癥的藥物。?

所述治療腫瘤的藥物具體可為殺死腫瘤細胞和/或抑制腫瘤細胞增殖的藥物。?

所述核酸適體可為含有核心序列的DNA。?

所述核酸適體還可含有側翼序列。所述側翼序列可為5′端側翼序列和/或3′端側翼序列。?

所述腫瘤細胞具體可為白血病細胞。?

當所述腫瘤細胞為白血病細胞時：所述核心序列可為序列表中的序列1、序列2、序列3、序列4、序列5、序列6、序列7、序列8、序列9、序列10或序列11中任意十個以上連續核苷酸所示的DNA序列；所述5′端側翼序列可為序列表中的序列12中任意三個以上連續核苷酸所示的DNA序列；所述3′端側翼序列可為序列表中的序列13中任意三個以上連續核苷酸所示的DNA序列。?