[發明專利]耶爾森氏鼠疫桿菌Caf1M蛋白的應用

有效

• 申請號: 200910083028.5
• 申請日: 2009-04-24
• 公開（公告）號: CN101533024A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發明（設計）人: 王鵬;張建中;俞東征;石國祥;胡源;閆笑梅;趙飛;肖迪;王海濱
• 申請（專利權）人: 中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;C07K14/24;C12N15/70;C12P21/02;C12R1/19
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司
• 代理人: 黃 健

1.鼠疫耶爾森氏菌Caf1M蛋白在制備鼠疫檢測和/或診斷制劑中的應 用；

其中，所述Caf1M蛋白為帶有或未帶有標簽的下述蛋白：

如SEQ?ID?No：2第21～258位所示的氨基酸序列組成的蛋白。

2.根據權利要求1所述的應用，其中，所述Caf1M蛋白為按照以下方 法制備得到的未去除或去除純化標簽后的蛋白：

設計引物，PCR擴增caf1M基因，然后克隆進表達載體中，轉化宿主細 胞，誘導培養陽性克隆，對誘導表達產物進行收集并純化。

3.根據權利要求2所述的應用，其中，所述用于擴增caf1M基因的引 物為：

caf1M-S??5’-CATGCCATGGGCGAACTCTGCTCAACCAGATA-3’

caf1M-A??5’-CCGCTCGAGTAAAGTCACATTTTTGGAATACA-3’。

4.根據權利要求2所述的應用，其中，所述擴增條件為：

95℃預變性5min；95℃變性60s，58℃退火30s，72℃延伸40s，30個 循環；72℃延伸5min。

5.根據權利要求2所述的應用，其中，將擴增得到的caf1M基因與 pGEX4t-1連接，得到重組質粒caf1M-pGEX4t-1，然后轉化宿主細胞。

6.根據權利要求2所述的應用，其中，所述誘導培養條件為：

終濃度0.1～1.0mmol/L的IPTG，24℃～38℃誘導1～10h。

7.根據權利要求1所述的應用，其中，所述鼠疫檢測和/或診斷制劑為 通過免疫學方法進行抗原抗體測定的制劑。

8.根據權利要求1所述的應用，其中，所述鼠疫檢測和/或診斷制劑為 噴涂有Caf1M蛋白的NC膜。

9.一種鼠疫檢測和/或診斷制劑，其包括鼠疫耶爾森氏菌Caf1M蛋白， 所述Caf1M蛋白為帶有或未帶有標簽的下述蛋白：

如SEQ?ID?No：2第21～258位所示的氨基酸序列組成的蛋白。