[發(fā)明專利]一種聚苯乙烯基質(zhì)核酸固相有機(jī)合成載體及其制備方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910080949.6
• 申請(qǐng)日: 2009-03-30
• 公開（公告）號(hào): CN101519467A
• 公開（公告）日: 2009-09-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蘇志國(guó);馬光輝;梁洪;張競(jìng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院過程工程研究所
• 主分類號(hào): C08F8/30
• 分類號(hào): C08F8/30;C07H21/00;C40B50/18;C08F112/08
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1.一種聚苯乙烯基質(zhì)核酸固相有機(jī)合成載體，其特征在于，它是將氨甲基聚苯乙烯載體與3-氨基-1-(4，4’-二甲氧三苯甲基)-1，2-丙二醇通過琥珀酸鍵偶聯(lián)得到的固相載體，具有如下結(jié)構(gòu)式：

其中，PS為聚苯乙烯載體，DMT為4，4’-二甲氧三苯甲基。

2.一種聚苯乙烯基質(zhì)核酸固相有機(jī)合成載體的制備方法，包含如下步驟：

(a)在濃度為0.1～5.0mmol/g載體的催化劑存在條件下，聚苯乙烯載體與N-氯甲基鄰苯二甲酰亞胺在有機(jī)溶液中反應(yīng)，得到鄰苯二甲酰亞胺甲基聚苯乙烯載體；

(b)鄰苯二甲酰亞胺甲基聚苯乙烯載體在濃度為3～30％肼的乙醇溶液中反應(yīng)，得到氨甲基聚苯乙烯載體；

(c)氨甲基聚苯乙烯載體與琥珀酸酐在有機(jī)溶液中反應(yīng)，得到琥珀酰胺甲基聚苯乙烯載體；

(d)在有機(jī)溶液中，琥珀酰胺甲基聚苯乙烯載體與3-氨基-1-(4，4’-二甲氧三苯甲基)-1，2-丙二醇間臂在濃度為1～10mmol/g載體的催化劑催化下于室溫反應(yīng)，得到如權(quán)利要求1所述聚苯乙烯基質(zhì)核酸固相有機(jī)合成載體。

3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其中所使用的有機(jī)溶劑為二氯甲烷、四氫呋喃、N，N’-二甲基甲酰胺、乙腈、三乙胺、吡啶、2，6-二甲基吡啶中的一種或幾種的混合溶劑。

4.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其中所使用的有機(jī)溶劑的量為2～100mL，更優(yōu)選的是4～50mL。

5.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其中的反應(yīng)時(shí)間為2～48h，更優(yōu)選的是2～24h。

6.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其中的反應(yīng)溫度為室溫～80℃。

7.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(a)所使用的聚苯乙烯載體DVB交聯(lián)度為0.5～15％，更優(yōu)選的是1％～3％。

8.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(a)所使用的聚苯乙烯載體粒徑范圍為20～1000μm，更優(yōu)選的是30～300μm。

9.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(a)所使用的催化劑是甲基磺酸、四氯化錫、氫氟酸、三氯化鐵、三氯化鐵-二苯甲酮、硝基甲烷中的一種。

10.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(a)所使用的催化劑的用量為0.1～5.0mmol/g載體，更優(yōu)選的是0.2～2.0mmol/g載體。

11.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(a)所使用的N-氯甲基鄰苯二甲酰亞胺的用量為0.2～5.0mmol/g載體，更優(yōu)選的是0.5～2.0mmol/g載體。

12.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(b)所使用的肼的乙醇溶液的濃度為3～30％，更優(yōu)選的是5％～15％。

13.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(b)所使用的肼的乙醇溶液的用量為5～50mL/g載體，更優(yōu)選的是10～25mL/g載體。

14.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(c)所使用的琥珀酸酐的用量為0.5～10mmol/g載體，更優(yōu)選的是1～5mmol/g載體。

15.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(d)所使用的3-氨基-1-(4，4’-二甲氧三苯甲基)-1，2-丙二醇間臂的用量為0.5～10mmol/g載體，更優(yōu)選的是1～5mmol/g載體。

16.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(d)所使用的催化劑種類為1-羥基苯并三唑、N，N’二環(huán)己基碳二亞胺、N，N′-二異丙基碳二亞胺中的一種或幾種的混合物。

17.如權(quán)利要求2所述的制備方法，步驟(d)所使用的催化劑的用量為1～10mmol/g載體，更優(yōu)選的是2～5mmol/g載體。

18.如權(quán)利要求1所述的核酸固相有機(jī)合成載體，其特征在于，所述的載體載量大于60μmol/g，偶聯(lián)效率大于95％。

19.如權(quán)利要求1所述的核酸固相有機(jī)合成載體，其特征在于，所屬的載體能夠滿足不同序列核酸合成的需要，是一種通用型的聚苯乙烯基質(zhì)核酸固相有機(jī)合成載體。