[發(fā)明專利]小鵝瘟、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910080863.3
• 申請日: 2009-03-26
• 公開（公告）號: CN101513527A
• 公開（公告）日: 2009-08-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 丁壯;叢彥龍;母連志;畢玉海
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林大學(xué)
• 主分類號: A61K39/295
• 分類號: A61K39/295;A61K39/12;A61K39/17;A61P31/14;A61P31/20
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 關(guān) 暢

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種小鵝瘟、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗及其制備方法。

背景技術(shù)

小鵝瘟(GD)是由鵝細(xì)小病毒(GPV)引起的一種急性和亞急性敗血癥，本病主要侵害出殼后3～20天的雛鵝，傳播速度快，病死率高；鵝副粘病毒病(GPM)是由鵝副粘病毒(GPMV)引起的一種以呼吸道紊亂、腹瀉為主要癥狀的病毒性傳染病，對雛鵝危害甚大。

目前，小鵝瘟防疫主要用小鵝瘟弱毒疫苗進行雛鵝免疫，但由于7～10天才可以產(chǎn)生足夠的保護性抗體，此空白期對于高度暴露的雛鵝來說相當(dāng)危險，生產(chǎn)實踐也證實免疫效果很差，因此急需一種免疫種鵝的強毒滅活疫苗以使雛鵝獲得母源抗體保護。

鵝副粘病毒病國外尚無報道，國內(nèi)研究也很少，無論滅活疫苗還是弱毒疫苗均為空白。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種小鵝瘟、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗及其制備方法。

本發(fā)明所提供的小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗，包括小鵝瘟病毒病滅活疫苗和鵝副粘病毒病滅活疫苗，所述小鵝瘟病毒病滅活疫苗是將禽胚胎接種小鵝瘟病毒鴨胚化弱毒株得到的胚液滅活得到的；所述鵝副粘病毒病滅活疫苗是將禽胚胎接種鵝副粘病毒強毒株得到的胚液滅活得到的。

所述接種小鵝瘟病毒鴨胚化弱毒株的禽胚胎為鴨胚，接種鵝副粘病毒強毒株的禽胚胎為SPF雞胚。

所述小鵝瘟病毒病滅活疫苗與所述鵝副粘病毒病滅活疫苗的體積份數(shù)比為4∶2.5～4∶3。

本發(fā)明提供一種小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗油乳劑，由終濃度為0.01克/毫升的硬脂酸鋁和下述體積份數(shù)的組分組成：

小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活含毒胚液?96體積份；

吐溫-80????????????????????????????????????4體積份；

注射用白油?????????????????????????????????94體積份；

司本-80????????????????????????????????????6體積份；

所述小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗為上述的疫苗。

本發(fā)明所提供的小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗的制備方法，是將接種小鵝瘟病毒鴨胚化弱毒株的禽胚胎和接種鵝副粘病毒強毒株的雞胚胎孵育，挑選在孵育96～216小時之間死亡的胚胎，收集胚液，在胚液中加入甲醛滅活得到小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗。

所述方法中，所述加入甲醛的終濃度為0.35％(體積百分比濃度)。

所述方法中，所述接種小鵝瘟病毒鴨胚化弱毒株的禽胚胎為鴨胚，接種鵝副粘病毒強毒株的禽胚胎為SPF雞胚；所述從接種小鵝瘟病毒鴨胚化弱毒株的禽胚胎收集的胚液與所述從接種鵝副粘病毒強毒株的禽胚胎收集的胚液的體積份數(shù)比為4∶2.5～4∶3。

所述方法中，所述禽胚胎為8～10日齡，所述接種途徑為尿囊腔接種，所述孵育的溫度為37攝氏度。

本發(fā)明提供的小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗油乳劑的制備方法，包括下述步驟：

1)油相制備：取注射用白油94體積份，加司本-80?6體積份，混合后，加硬脂酸鋁至濃度為0.02克/毫升，混勻滅菌；

2)水相制備：取吐溫-804體積份，滅菌，加入權(quán)利要求5-8所述的方法獲得的小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗96體積份，振搖使吐溫-80完全溶解；

3)乳化：取步驟1)獲得的油相1與步驟2)獲得的水相攪拌混勻，得到小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗油乳劑。

上述制備的疫苗，免疫劑量可為0.25ml-2ml/只母鵝，優(yōu)選0.5ml/只母鵝。

本發(fā)明的小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗可以直接對種鵝進行免疫，預(yù)防雛鵝的小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病。田間安全試驗證實，二聯(lián)苗對種鵝是安全的，對產(chǎn)蛋率、雛鵝成活率影響甚微。該二聯(lián)苗能使免疫鵝產(chǎn)生抵抗兩種病毒的抗體效價水平，其孵化后代亦具有堅強抵抗兩種病毒的抗體效價水平。免疫母鵝產(chǎn)蛋孵化后代的成活率為95％～98％(用戶觀察統(tǒng)計)，其2％～5％的未成活數(shù)大都系自然淘汰數(shù)和非特異死亡數(shù)。本發(fā)明小鵝瘟病毒病、鵝副粘病毒病二聯(lián)滅活疫苗油乳劑制備工藝獲得的油包水型油乳劑滅活苗乳化程序簡單、粘稠度適宜[用1毫升吸管(下口內(nèi)徑1.2毫米，上口內(nèi)徑2.7毫米)，吸取25攝氏度左右的疫苗1毫升，令其垂直自然流出，流出0.4毫升所需時間為6秒]。

具體實施方式