[發(fā)明專利]一種K4多肽合成產(chǎn)物及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910080293.8
• 申請日: 2009-03-17
• 公開（公告）號: CN101838306A
• 公開（公告）日: 2010-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 韓蘇
• 申請（專利權(quán)）人: 天津中天博奧生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07K7/02
• 分類號: C07K7/02;C07K14/00;A61K38/10;A61K38/16;A61P35/00;A61P37/04
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的多肽藥物的開發(fā)，具體涉及到設(shè)計和制備一種4拷貝分支肽在臨床上可抑制腫瘤生長和免疫增強(qiáng)劑上的應(yīng)用。

背景技術(shù)

生物體的遺傳基因被存儲在多聚核苷酸鏈上，遺傳基因編碼著執(zhí)行生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)。生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)多種多樣，它們行使著各種生物學(xué)功能維持生命活動。蛋白質(zhì)的種類雖然多不勝舉，但它們基本上都是由20個自然界存在的天然氨基酸組成。由于氨基酸的組成和排列順序的差異導(dǎo)致了蛋白質(zhì)的千差萬別。一般來說，含有50個以上氨基酸的分子被稱為蛋白質(zhì)，般超過10個氨基酸的肽鏈被稱為多肽，少于10個氨基酸的肽鏈被稱做寡肽。目前發(fā)現(xiàn)最小的功能小肽只有2個氨基酸，通常較為常見的是4個以上的功能小肽。

由于人類基因組計劃的完成和人類蛋白組計劃的開展，將會有越來越多的蛋白質(zhì)功能片段被發(fā)現(xiàn)并被作為藥物應(yīng)用到生物醫(yī)藥領(lǐng)域中來。蛋白質(zhì)的功能片段通常是指被發(fā)現(xiàn)具備某種特定生物學(xué)功能的直鏈多肽片段，它們通常是幾十個至兩個氨基酸組成的肽類片段，被鑒定和發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)功能片段可通過人工合成的途徑制備。現(xiàn)已開發(fā)并在臨床上得到應(yīng)用的多肽藥物有“催產(chǎn)素”、“胸腺肽α1”、“胸腺五肽”等，有在天然肽鏈的基礎(chǔ)上進(jìn)行人工改構(gòu)制備成為用于治療消化道出血和肢端肥大癥的多肽藥物“奧曲肽”和抗凝血作用的“水蛭肽”等。蛋白質(zhì)中的功能片段常常能篩選到含有幾十個或小到只有二個氨基酸組成的多肽片段，它們?yōu)槿斯ず铣啥嚯墓δ芷尾⑺鼈兺度霊?yīng)用奠定了基礎(chǔ)。

在蛋白質(zhì)、多肽或寡肽中，單一氨基酸的缺失、增加或被替換；氨基端(N端)或羧基端(C端)被封閉；序列中或游離端被化學(xué)基團(tuán)修飾都會使得蛋白質(zhì)、多肽或寡肽原有的生物活性發(fā)生不可預(yù)知的改變。設(shè)計、篩選和發(fā)現(xiàn)具有新的功能肽段或?qū)ふ腋咝щ亩问撬幬镩_發(fā)的一個重要環(huán)節(jié)。

一段含有4個氨基酸的寡肽蘇氨酸-賴氨酸-亮氨酸-賴氨酸(Thr-Lys-Leu-Lys，或TKLK)被發(fā)現(xiàn)具有和脾臟產(chǎn)生的生物活性小肽Tuftsin蘇氨酸-賴氨酸-脯氨酸-精氨酸(Thr-Lys-Pro-Arg，或TKPR)具有相近似的生物活性作用(United?States?Patent：5,028,593，filed：August15，1989)。實(shí)驗證明Tuftsin能使脾內(nèi)脾小體增多，生發(fā)中心生長活躍，增強(qiáng)粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞的趨化、游離、吞噬和產(chǎn)生細(xì)胞毒等作用，提高淋巴系統(tǒng)的細(xì)胞免疫功能。Tuftsin不僅促進(jìn)單核吞噬細(xì)胞的MHC非限制性功能，還促進(jìn)其限制性的抗原遞呈功能，提高細(xì)胞毒作用。

本發(fā)明涉及設(shè)計和制備一種含有4拷貝TKLK片段的肽類分子以進(jìn)一步有效提高其免疫功能及抗腫瘤活性，開發(fā)一種可在臨床應(yīng)用的抗腫瘤藥物和免疫增強(qiáng)劑。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種4拷貝分支肽及其在抑制腫瘤生長的藥物和免疫增強(qiáng)劑上的應(yīng)用，所要解決的技術(shù)問題是使該4拷貝分支肽不僅保留功能寡肽的生物學(xué)活性而且顯著提高其生物學(xué)活性。

本發(fā)明的目的及解決其技術(shù)問題是采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明提出一種4拷貝分支肽，是將具有該氨基酸序列特征組成的寡肽片段通過具有2個活化氨基可供進(jìn)行氨基酸加成縮合反應(yīng)的賴氨酸(Lys，用＞K-表示)連接的橋梁鏈制備成4拷貝分支分子，其結(jié)構(gòu)通式為：(X_A-X_B-X_C-X_D-X₁)₄＞(K-X₂)₂＞K-X₃，其中，X_A代表極性不荷電氨基酸，包括絲氨酸(Ser，S)、蘇氨酸(Thr，T)、半胱氨酸(Cys，C)、脯氨酸(Pro，P)、谷氨酰胺(Gln，Q)、天門冬酰胺(Asn，N)；X_B和X_D代表堿性氨基酸，包括組氨酸(His，H)、賴氨酸(Lys，K)、精氨酸(Arg，R)；X_c代表非極性脂肪族氨基酸，包括甘氨酸(Gly，G)、丙氨酸(Ala，A)、纈氨酸(Valine，V)、亮氨酸(Leu，L)、異亮氨酸(Ile，I)、蛋氨酸(Met，M)。