[發明專利]一種重要發熱病原快速篩查系統

有效

• 申請號: 200910080257.1
• 申請日: 2009-03-17
• 公開（公告）號: CN101504414A
• 公開（公告）日: 2009-08-12
• 發明（設計）人: 王靜;楊永莉;孫肖紅;楊宇;胡孔新
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/546;G01N33/538
• 代理公司: 北京中創陽光知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 尹振啟

技術領域

本發明涉及一種蛋白懸浮芯片及其制備方法與應用，尤其涉及同時 檢測幾種引起發熱的感染性病原抗體的檢測如結核抗體、流感抗體、禽 流感抗體、鼠疫抗體、SARS抗體等的蛋白懸浮芯片及其制備方法與應用， 屬于免疫技術及臨床檢測技術領域

背景技術

2003年全球SARS流行、亞洲各國頻頻爆發的禽流感、登革熱、中 緬邊境的惡性瘧疾、此起彼伏的腦炎、流感、又進入活躍期的鼠疫、美 國的西尼羅熱、非洲的埃博拉出血熱等，引起民眾對傳染病的廣泛恐懼。 世界衛生組織2002年關于傳染病的分析報告中指出，全世界每小時有 1500人死于傳染病。而發熱是傳染病最常見最為突出的臨床癥狀之一。 目前已知能引起發熱的物質有許多種，但與發熱最相關的是生物源的， 如結核分枝桿菌、流感病毒、禽流感病、鼠疫菌、SARS、毒炭疽桿菌、 登革病毒、西尼羅病毒、肺炎衣原體、支原體感染等。由于每一個感染 者都是一個快速流動、難以控制的傳染源，實施快速檢測，及時、快速 鑒別病原是傳染病防控早發現、早預警、早處置的基礎和前提。目前病 原的快速檢測技術發展很快，針對不同的生物標識物分別發展了不同的 快速檢測方法。如檢測核酸的各類PCR、原位雜交、DNA芯片、NASBA 等技術，檢測蛋白質等抗原、抗體物質的ELISA、免疫層析技術、蛋白 芯片技術等，都具有各自的特點。針對病原核酸的PCR等快速檢測技術 需依賴儀器的基因擴增和電泳過程，也依賴操作人員的技術水平，難以 滿足口岸現場簡便快速篩查需要。一般的方法主要檢測單種病原或傳染 病，面對一個發熱患者，難以實現多病因的同時篩查。快速篩查是早期 識別傳染病的關鍵，傳染病的快速檢測技術水平不僅關系人民的生命健 康，也關系著中國的檢疫水平在國際上的可信程度和聲譽，影響著我國 對外的人員交流活動和國家的國際形象，也影響著能否控制傳染病的傳 入傳出避免外事糾紛。因此，??快速檢測技術的提高是傳染病防控工作 非常重要的環節，加強快速檢測技術應用基礎研究刻不容緩，具有非常 重要的意義：既是提高我國衛生檢疫防疫整體工作水平和質量的需要 又維護我國公共衛生安全的需要。

懸浮芯片(suspension?array)也稱液相芯片(liquid?array，liquid?chip)， 是20世紀70年代美國Luminex公司研制出的新一代生物芯片技術，利 用帶編碼的微球體作為載體，流式細胞儀作為檢測平臺，對核酸、蛋白 質等生物分子進行大規模測定。懸浮芯片的基本原理是利用聚苯乙烯 (polystyrene)所制作的微球，包覆不同比例的紅光及紅外光發色劑， 而產生100種不同比例顏色，作為100種獨特的色彩編號，每顆微球 大小約5.5μm，可依不同研究目的如免疫分析、核酸研究、酶分析、受 體和配體識別分析等，并根據不同研究目的而標定特定抗體、核酸探針 及各種受體探針。標記探針的微球與待測物在96孔板中進行反應。反 應后，利用機器自動將反應液吸起并通過一微細管檢測通道每次僅允 許一個微球通過檢測通道，檢測通道中設有兩道激光，一道為紅色，激 發微球基質中的顏色，識別微球分類編碼以確定檢測項目；一道為綠色， 激發報告分子的顏色，記錄信號強弱以檢測待測物的含量。當待測樣本 與特定微球的探針吸附在一起時，兩道激光所激發的光都可被檢測到。 而若樣本中不含該標的物，則僅有微球中的激發光可被檢測到。再通過 機器與計算機自動統計分析兩道激光所激發的微球種類與數量，從而判 定待測樣本中有幾種測試目標物在其中，得知測試樣本中有無待測病原 存在，或同時存在有幾種至數十種病原。

與以往的技術相比，當今發展的生物芯片技術可以實現把幾種發熱 病原一次性聯合檢測的目的，目前產生的懸浮芯片技術還是生物芯片的 一種，它除了可以檢測多種病原以外，還具有比ELISA反應更加充分的 液相環境，且具有省時省力，特異性強，靈敏度高，并且無創傷的優點。 因此研制和開發一種重要發熱病原快速篩查系統對我國出入境人員的 快速檢測其有無攜帶傳染病原的監測有重要的研究意義。

發明內容

本發明的目的在于為人們提供一種重要感染病原快速篩查系統的 蛋白懸浮芯片檢測方法，實現能在短時間內同時檢測幾種引起發熱的病 原抗體，從而得出被檢測人員有沒被相應病原感染，有無疫情的發生， 為出入境人員能夠快速通過出有無攜帶外來傳染病原的出入境體檢的 需要節約了時間，又能有效保障我國公共衛生安全。