[發(fā)明專利]一種真菌測(cè)試瓶的生產(chǎn)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910079171.7
• 申請(qǐng)日: 2009-03-04
• 公開（公告）號(hào): CN101824380A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 易紹金
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 長(zhǎng)江大學(xué)
• 主分類號(hào): C12M1/24
• 分類號(hào): C12M1/24;C12Q1/04;C12R1/645
• 代理公司: 北京市中實(shí)友知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11013
• 代理人: 熊成香

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種真菌測(cè)試瓶的生產(chǎn)方法，屬應(yīng)用微生物檢測(cè)方法技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

在科研和生產(chǎn)的實(shí)際工作中，常常需要對(duì)微生物的數(shù)量進(jìn)行測(cè)定。對(duì)水體、空氣、土壤等環(huán)境中的微生物測(cè)定可以監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)其污染程度；對(duì)飲用水和工業(yè)循環(huán)冷卻水中的微生物測(cè)定可以評(píng)價(jià)其是否達(dá)標(biāo)；對(duì)油田污水注水中微生物數(shù)量的測(cè)定則有助于評(píng)價(jià)污水注水水質(zhì)等。因此，微生物數(shù)量的測(cè)定對(duì)科研和生產(chǎn)實(shí)際工作具有十分重要的指導(dǎo)作用和現(xiàn)實(shí)意義。

微生物測(cè)定常用的方法有平板菌落計(jì)數(shù)法和絕跡稀釋法。平板菌落計(jì)數(shù)法是根據(jù)每個(gè)活的細(xì)菌能長(zhǎng)出一個(gè)菌落的原理設(shè)計(jì)的，取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然后將定量的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù)及稀釋倍數(shù)，計(jì)算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù)；而絕跡稀釋法是將待測(cè)定的水樣逐級(jí)注入到試管中進(jìn)行接種稀釋，直到最后一個(gè)試管中無(wú)菌生長(zhǎng)為止，然后根據(jù)細(xì)菌生長(zhǎng)情況和稀釋倍數(shù)，計(jì)算出水樣中細(xì)菌的數(shù)目。這兩種方法都有明顯的不足，平板菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定結(jié)果誤差較大，而絕跡稀釋法操作極為繁瑣、費(fèi)時(shí)。

在工業(yè)循環(huán)冷卻水中普遍存在著真菌。真菌的存在會(huì)污染冷卻水水質(zhì)，形成生物淤泥進(jìn)而影響熱交換，并參與腐蝕。為了有效控制真菌危害，需對(duì)真菌進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定。目前，國(guó)內(nèi)外普遍采用平板菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定工業(yè)循環(huán)冷卻水中的真菌，但該法測(cè)定結(jié)果誤差較大，并繁瑣、費(fèi)時(shí)。因此，現(xiàn)有的傳統(tǒng)測(cè)試技術(shù)和測(cè)試手段存在明顯缺陷，遠(yuǎn)不能滿足實(shí)際生產(chǎn)的要求。

發(fā)明內(nèi)容：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種真菌測(cè)試瓶的生產(chǎn)方法，使所生產(chǎn)的測(cè)試瓶能夠快速準(zhǔn)確地測(cè)定水樣中的真菌菌數(shù)。

本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)上述目的的。

在常溫下，分別取蛋白胨0.5％、磷酸二氫鉀0.1％、硫酸鎂0.05％、葡萄糖1.0％，蒸餾水98.35％，然后依次用蒸餾水將其溶解，并加入到容器中混合、充分搖勻，用0.5mol/L的硫酸溶液將溶液的pH值調(diào)節(jié)到3.8--4.0，即配制成培養(yǎng)液；將12ml模制西林瓶清洗干凈、干燥，用液體分裝器將所配制的培養(yǎng)液按每瓶9.0ml培養(yǎng)液裝入瓶中，然后加蓋、封口；將經(jīng)加蓋封口的測(cè)試瓶用高溫蒸汽滅菌鍋在121℃、1.05Kg/cm²條件下進(jìn)行高溫滅菌18分鐘，冷卻后即制成真菌測(cè)試瓶。

本發(fā)明與現(xiàn)有的技術(shù)相比具有如下有益效果：

1、本發(fā)明所述的一種真菌測(cè)試瓶的生產(chǎn)方法，生產(chǎn)過(guò)程簡(jiǎn)單，可靠性強(qiáng)，經(jīng)濟(jì)實(shí)用。

2、本發(fā)明所生產(chǎn)的真菌測(cè)試瓶能夠快速準(zhǔn)確地測(cè)定水樣中的真菌的菌數(shù)，操作使用簡(jiǎn)單、結(jié)果直接準(zhǔn)確。

3、本發(fā)明所生產(chǎn)的培養(yǎng)液的pH為3.8--4.0，只適合真菌生長(zhǎng)，所培養(yǎng)出的微生物只是真菌，測(cè)試工作不會(huì)受細(xì)菌的干擾。

具體實(shí)施方式：

在常溫下(以配制1L培養(yǎng)液為例，以此類推)，分別稱取蛋白胨5.0g、磷酸二氫鉀1.0g、硫酸鎂0.5g、葡萄糖10.0g，然后依次用蒸餾水將其溶解，并加入到1L容量瓶中混合、再用蒸餾水定容到1L刻度線，充分搖勻，用0.5mol/L的硫酸溶液將溶液的pH值調(diào)節(jié)到3.8--4.0，即配制成真菌測(cè)試瓶所需的培養(yǎng)液。將12ml模制西林瓶清洗干凈、干燥，用液體分裝器將所配制的培養(yǎng)液按每瓶9.0ml培養(yǎng)液分裝入瓶中，然后用A-13型藥用膠塞加蓋，用普通抗生素玻璃瓶鋁蓋經(jīng)專用封口器封口，最后用高溫蒸汽滅菌鍋在121℃、1.05Kg/cm²條件下將測(cè)試瓶進(jìn)行集中滅菌18分鐘，冷卻后即制成真菌測(cè)試瓶。

采用真菌測(cè)試瓶測(cè)定待測(cè)水樣中的真菌的菌數(shù)時(shí)，系采用絕跡稀釋法原理，將待測(cè)水樣用無(wú)菌注射器逐級(jí)注入測(cè)試瓶中稀釋培養(yǎng)，直到最后一個(gè)測(cè)試瓶無(wú)真菌生長(zhǎng)為止，根據(jù)稀釋的倍數(shù)計(jì)算出待測(cè)水樣中真菌的數(shù)目。可采用以下的方法和步驟：

(1)準(zhǔn)備數(shù)支相同的1ml醫(yī)用注射器，用蒸餾水清洗干凈后高溫滅菌(高壓蒸汽滅菌鍋121℃、1.05Kg/cm²下滅菌18分鐘)，冷卻備用。

(2)根據(jù)待測(cè)水樣中真菌的大致多少，將數(shù)個(gè)上述的真菌測(cè)試瓶排成一組，并依次編上序號(hào)1、2、3、4……。

(3)用上述滅菌后的無(wú)菌注射器取1.0mL待測(cè)水樣并注入到1號(hào)真菌測(cè)試瓶?jī)?nèi)，充分震蕩10秒。

(4)另取一支無(wú)菌注射器從搖勻后的1號(hào)真菌測(cè)試瓶?jī)?nèi)取出1.0mL液體注入到2號(hào)真菌測(cè)試瓶?jī)?nèi)，充分震蕩10秒。

(5)再另取一支無(wú)菌注射器從搖勻后的2號(hào)真菌測(cè)試瓶?jī)?nèi)取出1.0mL液體注入到3號(hào)真菌測(cè)試瓶?jī)?nèi)，充分震蕩10秒。