[發明專利]卡介苗活菌數快速檢測的儀表裝置及方法

有效

• 申請號: 200910077952.2
• 申請日: 2009-02-04
• 公開（公告）號: CN101793837A
• 公開（公告）日: 2010-08-04
• 發明（設計）人: 田青;蔡新霞;羅金平;劉曉紅;劉春秀
• 申請（專利權）人: 中國科學院電子學研究所
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N1/28;G01N1/44
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 周國城

技術領域

本發明涉及生物醫學檢測技術領域，是一種卡介苗活菌數快速檢測的 儀表裝置及方法。

背景技術

肺結核病是一種慢性傳染疾病，其傳染途徑主要是通過呼吸道傳染， 健康人吸入帶有結核菌的飛沫后可受到結核菌感染。2005年，在全國法定 報告傳染病疫情中，肺結核居報告發病數和死亡數首位，結核病已成為傳 染病的首要殺手，近年來發病率有上升的趨勢，給我國的國民經濟生活、 人民生命健康造成了極大的危害，因此，對結核病的預防和早期診治具有 重要的現實意義。

卡介苗是一種減毒的活性牛型結核桿菌疫苗，是人們經過長期實踐創 造出來的一種減毒菌苗，它注入人體后，能使人體內產生對結核桿菌的免 疫力，防止感染和發生結核病。現已公認，接種卡介苗是預防結核病十分 有效的措施，目前，世界上多數國家都已將卡介苗列為計劃免疫必須接種 的疫苗之一。在卡介苗藥物的生產和保存過程中，需要對卡介苗質量進行 鑒定，即活菌數是否達到合格標準，要求活菌數大于1×10⁶個/mg，將1mg 樣品配置成1mL的檢測溶液，即要求卡介苗的活菌數濃度大于1×10⁶CFU/mL。常規的檢測方法是取一定量的試樣在試管中進行活菌斜面培養 計數，但這種方法費時費力，培養時間通常需要1個月，檢測速度慢，且 這種方法操作復雜，檢測效率較低，國家檢定部門及防疫系統在監測疫苗 質量時亦不能及時獲得結果，影響了質量管理，因此，急需要建立一種快 速、簡便、準確的活菌測試方法。

國內外均有相關機構開展卡介苗活菌數快速檢測方法相關研究。研究 方法主要有ATP生物發光法和XTT方法。但是這些方法一般都要使用包 括發光光度計在內的多種儀器，操作步驟較為繁瑣，至今未有專用的卡介 苗活菌數檢測儀表裝置問世。市場上有一些基于ATP生物發光法的細菌快 速檢測儀器，但由于卡介苗細胞壁較厚，而且細胞壁外還有一層較厚莢膜， 一般的裂解試劑很難使其裂解，因此這些儀器都無法直接用于卡介苗快速 檢測。

本發明采用ATP生物發光法，設計了一個專用于卡介苗活菌數快速檢 測的儀表裝置，儀表內置超聲裂解裝置和加熱裂解裝置，有效克服了卡介 苗難于裂解的特點，該儀表裝置具有操作簡便，檢測速度快等優點。

發明內容

本發明的目的是提供一種卡介苗活菌數快速檢測的儀表裝置及方法， 該裝置及方法通過裂解卡介苗，檢測卡介苗胞內ATP發光強度，實現卡介 苗活菌數快速檢測，其完成一次檢測不超過15分鐘，與現有培養法相比 具有很大的優勢。

為達到上述目的，本發明的技術解決方案是：

一種卡介苗活菌數快速檢測的儀表裝置，其內置超聲裂解裝置和發熱 裂解裝置，結合ATP生物發光技術及高精度微弱光檢測技術，實現卡介苗 活菌數快速檢測。

所述的裝置，其包括主控計算單元、模數信號轉換信號采集電路、信 號放大電路、驅動控制電路、光電倍增管、超聲裂解裝置和加熱裂解裝置； 其中，主控計算單元分別與模數信號轉換信號采集電路、驅動控制電路、 顯示、存儲、通信、按鍵控制功能模塊和電源模塊直接電連接；驅動控制 電路與光電倍增管、超聲裂解裝置、加熱裂解裝置直接電連接；光電倍增 管順序經信號放大電路、模數轉換信號采集電路與主控計算單元輸入端電 連接；

光電倍增管設于反應池側面，超聲裂解裝置至于反應池上方，加熱裂 解裝置位于反應池下方，超聲裂解裝置和加熱裂解裝置由電源模塊取電； 驅動控制電路另一輸出端分別與超聲裂解裝置、加熱裂解裝置的輸入端電 連接。

一種所述的裝置的檢測方法，其包括步驟：

A)將卡介苗凍干粉溶解后加入儀器反應池；

B)由主控計算單元先經驅動控制電路控制超聲裂解裝置、加熱裂解裝 置進行卡介苗裂解，裂解溫度為96-98℃；

C)卡介苗裂解后，釋放出胞內ATP，即向反應池內加入ATP發光反應 試劑；

D)發光反應進行3-20秒鐘后，再由主控計算單元經驅動控制電路啟 動光電倍增管檢測微弱熒光信號，輸出的電流信號，經信號放大電路、模 數信號轉換信號采集電路，轉換成數字電壓信號，反饋給主控計算單元；

E)主控計算單元根據預定算法，計算出卡介苗活菌數，并控制測試結 果的存儲、顯示和通信傳輸。