[發明專利]輔助鑒定五指山小型豬近交系的方法及其專用試劑盒

無效

• 申請號: 200910077929.3
• 申請日: 2009-02-04
• 公開（公告）號: CN101532055A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發明（設計）人: 馮書堂;李凱;牟玉蓮;楊述林;李奎
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 關 暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及一種輔助鑒定五指山小型豬近交系的方法及其專用試劑盒。

背景技術

我國改革開放初期，1983-1984年研究者在西德學習時，有幸參觀西德哥廷根小型豬(Gottengen?Minieture?Pig)育種中心，了解到西方國家已將小型豬大量應用于人類疾病動物模型，同時又是豬胚胎工程極好的研究對象，哥廷根小型豬已銷售到多個國家和地區，于是產生了引回中國開發應用的念頭。西德哥廷根小型豬育種專家之一施密特教授對中國梅山豬感興趣，建議西德農業部列為雙邊合作研究專項支持，研究者回國后也得到農業部的資助。但由于種種原因未能實現，關鍵是西德不輕易通過合作研究的方式把資源送給中國。在此期間，國內經歷了大規模的家畜品種資源調查，發現了眾多特異性畜禽品種，五指山小型豬(Wuzhishan?mini-pig)就是其中一例，但已瀕臨滅絕(見1987年7月原中國農業科學院畜牧研究所馮維奇研究員、原廣東省畜牧研究所王正研究員等十七人參加的考察報告)。從資料上分析，WZSP的小型化特征、遺傳穩定性要遠遠好于西德哥廷根小型豬，將會具有較好的應用前景。

中國農業科學院畜牧研究所自1987年至今，歷經20年的努力，在農業部、科技部、國家自然科學基金委等先后資助下，累計先后投資1500萬元，從我國體型小、瀕臨滅絕的珍稀品種五指山小型豬(WZSP)中，分離、培育出世界上首批近交系豬。將五指山小型豬進行全同胞、親仔或祖孫三世代內近交繁育10代以上得到的近交小型豬種群，試驗證明基因高度純合、遺傳非常穩定，被命名為五指山小型豬近交系(ZL02149030.9)。培育的該近交系較之原始種豬群具有性情溫順、遺傳背景清楚、基因高度純合、體色為黑白花、體型和毛色一致性好，較之國內外品種更具有體型小、遺傳穩定等優勢。在人類比較醫學，如燒傷植皮、心血管模型、口腔牙齒疾病、異種器官移植等深層次、多方位研究和開發利用結果亦表明：它不僅是肉豬育種、高檔肉食加工的優良素材，更是實驗動物模型研究的最佳選擇。WZSP近交系在人類比較醫學研究、異種器官移植研究中將發揮特殊的作用和不可估量的貢獻。

發明內容

本發明的目的是提供一種輔助鑒定五指山小型豬近交系的方法及其專用試劑盒。

本發明提供了一種輔助鑒定五指山小型豬近交系和/或非五指山小型豬近交系的方法，是以待測豬的基因組DNA為模板，利用由序列表中序列1所示的核苷酸序列和序列表中序列2所示的核苷酸序列組成的引物對進行PCR擴增，檢測擴增產物，然后通過如下a)的方法判斷五指山小型豬近交系或通過如下b)的方法判斷非五指山小型豬近交系：

a)擴增產物中只有151bp的片段的待測豬為候選的五指山小型豬近交系；

b)擴增產物中沒有151bp的片段，或擴增產物中除151bp的片段外還有其它片段的待測豬為非五指山小型豬近交系。

所述方法中，具體可采用ABI3130XL遺傳分析儀檢測擴增產物。

所述五指山小型豬近交系具體可為第F₁₃至F₁₈代。

本發明還保護由序列表中序列1所示的核苷酸序列和序列表中序列2所示的核苷酸序列組成的引物對在制備輔助鑒定五指山小型豬近交系的試劑盒中的應用。

本發明還保護由序列表中序列1所示的核苷酸序列和序列表中序列2所示的核苷酸序列組成的引物對在制備輔助鑒定非五指山小型豬近交系的試劑盒中的應用。

本發明還提供了一種輔助鑒定五指山小型豬近交系的試劑盒，包括由序列表中序列1所示的核苷酸序列和序列表中序列2所示的核苷酸序列組成的引物對。

本發明還提供了一種輔助鑒定非五指山小型豬近交系的試劑盒，包括由具有序列表中序列1的核苷酸序列和具有序列表中序列2的核苷酸序列組成的引物對。

本發明發現五指山小型豬近交系的基因組DNA中，在Sw510微衛星座位上是純合的。

本發明的方法和試劑盒均可應用于五指山小型豬的育種。