[發明專利]表達促凋亡基因的靶向增殖的重組腺病毒及其應用無效
| 申請號: | 200910077912.8 | 申請日: | 2009-02-03 |
| 公開(公告)號: | CN101497876A | 公開(公告)日: | 2009-08-05 |
| 發明(設計)人: | 阮國瑞;謝敏;馬大龍;錢其軍;黃曉軍;陳珊珊;吳紅平;李琳芳;常艷;牛繼紅;李金蘭 | 申請(專利權)人: | 北京大學人民醫院 |
| 主分類號: | C12N7/01 | 分類號: | C12N7/01;C12N15/85;A61K48/00;A61P35/00;A61P35/02;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 | 代理人: | 關 暢;任鳳華 |
| 地址: | 100044北京市西城區西直門南大街1*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 表達 促凋亡 基因 靶向 增殖 重組 病毒 及其 應用 | ||
1.包括PDCD5基因表達盒的重組腺病毒,所述PDCD5基因表達盒自上游至下游依次包括如下組件:啟動子、人PDCD5的cDNA、終止子和SV40polyA信號序列;
所述PDCD5基因表達盒中,所述啟動子為小鼠CMV啟動子,所述終止子為TGA終止子,所述SV40polyA信號序列位于所述終止子的下游;
所述重組腺病毒是將所述PDCD5基因表達盒插入SG600病毒基因組得到的。
2.如權利要求1所述的重組腺病毒,其特征在于:所述重組腺病毒是將重組表達載體pPE3-F11B-PDCD5與pSG600共轉染哺乳動物細胞得到;
所述pPE3-F11B-PDCD5是pENTR11-PDCD5和pPE3-F11B-RC按照圖3所示的方式重組得到的;所述pENTR11-PDCD5是將Age?I和Not?I酶切pClon15-PDCD5得到的小片段與Age?I和Not?I酶切pENTR11-Linker得到的大片段按照圖2所示的方式連接得到的;所述pClon15-PDCD5是將PDCD5基因按照圖1所示的方式插入pClon15得到的。
3.如權利要求2所述的重組腺病毒,其特征在于:所述哺乳動物細胞為293細胞;所述PDCD5基因為用EcoR?I酶切pDC316-PDCD5得到的小片段。
4.重組表達載體pPE3-F11B-PDCD5,所述pPE3-F11B-PDCD5是pENTR11-PDCD5和pPE3-F11B-RC按照圖3所示的方式重組得到的;所述pENTR11-PDCD5是將Age?I和Not?I酶切pClon15-PDCD5得到的小片段與Age?I和Not?I酶切pENTR11-Linker得到的大片段按照圖2所示的方式連接得到的;所述pClon15-PDCD5是將PDCD5基因按照圖1所示的方式插入pClon15得到的。
5.如權利要求4所述的重組表達載體,其特征在于:所述PDCD5基因為用EcoRI酶切pDC316-PDCD5得到的小片段。
6.一種藥物,它的活性成分為權利要求1-3中任一所述的重組腺病毒;所述藥物為如下1)和/或2)和/或3)和/或4)的藥物:
1)抑制腫瘤細胞生長的藥物;
2)誘導腫瘤細胞凋亡的藥物;
3)抑制腫瘤生長的藥物;
4)治療癌癥的藥物。
7.如權利要求6所述的藥物,其特征在于:所述腫瘤細胞為白血病細胞系細胞;所述腫瘤細胞為K562細胞、MEG-01細胞、Dami細胞、NB4細胞或6T-CEM細胞;所述腫瘤為白血病;所述癌癥為白血病。
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