[發(fā)明專利]一種轉(zhuǎn)化芽孢桿菌的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910077643.5 | 申請日： | 2009-02-10 |
| 公開（公告）號： | CN101481709A | 公開（公告）日： | 2009-07-15 |
| 發(fā)明（設計）人： | 汪兵;郭瑾;楊建國 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京中天諾亞體育科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/87 | 分類號： | C12N15/87;C12R1/07;C12R1/125;C12R1/10 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人： | 關(guān) 暢;任鳳華 |
| 地址： | 100049北京市海淀*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 轉(zhuǎn)化 芽孢 桿菌 方法 | ||
1.一種轉(zhuǎn)化芽孢桿菌的方法，是以芽孢桿菌原生質(zhì)體為轉(zhuǎn)化受體，用電穿孔法將 DNA分子導入芽孢桿菌原生質(zhì)體中；
所述芽孢桿菌原生質(zhì)體是按照如下方法制備的：芽孢桿菌在PAB培養(yǎng)液培養(yǎng)，收 集所述芽孢桿菌，用菌體保護液重懸，然后加入溶菌酶獲得芽孢桿菌原生質(zhì)體；所述 PAB培養(yǎng)液為25％(體積百分含量)4×PAB培養(yǎng)液，所述4×PAB培養(yǎng)液含有5-7g/L牛 肉膏、5-7g/L酵母膏、18-22g/L蛋白胨、4.3-6.5g/L?KH2PO4、13-15g/L?NaCl、 17.5-20.3g/L?K2HPO4·3H2O、3-5g葡萄糖；所述菌體保護液含有19-22g/L?BSA、1.8-2.2M 蔗糖、25％(體積百分含量)4×PAB培養(yǎng)液，50％(體積百分含量)2×SMM培養(yǎng)液， 所述2×SMM培養(yǎng)液含有3.8-5.0g/L馬來酸、7.5-9.0g/L?MgCl2·6H2O，1.8-2.2M蔗 糖，pH6.2-6.8；
所述芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌或地衣芽孢桿菌。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述電穿孔法為在25μF電容，400 Ω電阻，0.3-0.5kV電擊電轉(zhuǎn)液中的枯草芽孢桿菌原生質(zhì)體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述電穿孔法為在25μF電容，400 Ω電阻，0.6-0.8kV電擊電轉(zhuǎn)液中的地衣芽孢桿菌原生質(zhì)體。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述電轉(zhuǎn)液含有19-22g/L?BSA、 1.8-2.2M蔗糖、47％-55％(體積百分含量)2×SMM培養(yǎng)液、20-28％(體積百分含量)4 ×PAB培養(yǎng)液。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于北京中天諾亞體育科技有限公司，未經(jīng)北京中天諾亞體育科技有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/200910077643.5/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
