[發明專利]狂犬病街毒株HN10全基因組序列及其制備方法和用途無效
| 申請號： | 200910077116.4 | 申請日： | 2009-01-15 |
| 公開（公告）號： | CN101463355A | 公開（公告）日： | 2009-06-24 |
| 發明（設計）人： | 唐青;李浩 | 申請（專利權）人： | 中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所 |
| 主分類號： | C12N15/47 | 分類號： | C12N15/47;C12N15/11;C12N15/10;C12N15/86 |
| 代理公司： | 北京北新智誠知識產權代理有限公司 | 代理人： | 程鳳儒 |
| 地址： | 100052北京市宣武區迎新街100*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 狂犬病 街毒株 hn10 基因組 序列 及其 制備 方法 用途 | ||
1.一種狂犬病街毒株HN10全基因組序列擴增引物，其特征在于，所述全基因組序列如SEQ?ID?No.1所示，所述擴增引物如SEQ?ID?No.2至SEQ?ID?No.49所示，共24個引物對。
2.一種制備狂犬病街毒株HN10全基因組序列的方法，其特征在于，引物合成如SEQ?ID?No.2至SEQ?ID?No.49所示，針對所示引物將病毒基因組序列分為24段；利用SEQ?ID?No.2至SEQ?ID?No.49所示引物分別對分段基因序列進行目的基因的PCR擴增；目的基因片段的回收，測序；對所測定的序列利用生物軟件對各段序列重疊部分的比對作用進行序列拼接，將24個片段首尾相接，最終得到狂犬病街毒株HN10全基因組序列，如SEQ?ID?No.1所示。
3.根據權利要求2所述的一種制備狂犬病街毒株HN10全基因組序列的方法，其特征在于，所述病毒基因組序列分段為：根據SEQ?ID?No.2至SEQ?ID?No.49所示引物將病毒逆轉錄產物cDNA分為24個片段，每片段不超過1.1kb。
4.根據權利要求2所述的一種制備狂犬病街毒株HN10全基因組序列的方法，其特征在于，所述步驟PCR擴增反應體系為：H2O?34.5ul，10×Pfx擴增緩沖液5ul，10mM?dNTP?mix?1.5ul，50mM?MgSO4?1ul，正向引物F?1ul，反向引物R?1ul，cDNA?5ul，Pfx?DNA聚合酶1ul；
PCR循環條件參數：先用94℃2min進行一個循環，然后用94℃?15sec；50℃?30sec；68℃?40sec進行35個循環，最后再進行一個68℃?10min的延伸。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所，未經中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/200910077116.4/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
