[發明專利]一種游離甲狀腺素的磁微粒化學發光檢測試劑盒及其應用

無效

• 申請號: 200910076910.7
• 申請日: 2009-01-14
• 公開（公告）號: CN101551389A
• 公開（公告）日: 2009-10-07
• 發明（設計）人: 溫雷
• 申請（專利權）人: 天津九鼎醫學生物工程有限公司;溫雷
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于免疫診斷技術領域，具體涉及一種游離甲狀腺素fT₄定量檢測試劑盒，本發明還涉及利用上述試劑盒進行檢測游離甲狀腺素的方法。

背景技術

甲狀腺素是甲狀腺濾泡細胞合成及分泌的激素，甲狀腺生成的甲狀腺素T₄運送到血液循環中后，大部分與蛋白質結合，結合部分的甲狀腺素T₄沒有生物活性，其高低不能反映甲狀腺的功能狀態，僅約0.03％的甲狀腺素T₄呈游離狀態存在于血液中，游離甲狀腺素fT₄是循環血中甲狀腺激素的活性部分，具有生物活性，與甲狀腺素T₄在血液中保持相對恒定，維持其正常的生理功能，因此游離甲狀腺素fT₄高低能較準確地反應甲狀腺功能狀態，它不受血中甲狀腺球蛋白TBG和含碘雜質的影響，游離甲狀腺素fT₄進入靶細胞發揮作用，它是反映甲狀腺功能最確切的指標之一。測定血清中游離甲狀腺素fT₄含量，是評價甲狀腺功能最靈敏的指標之一。臨床上甲亢時游離T₄、游離T₃均升高并比TT₄、TT₃靈敏。甲亢早期和復發前兆的甲亢，血清游離甲狀腺素fT₄正常，而游離碘甲狀腺原氨酸fT₃可明顯升高。在甲低的診斷上，游離甲狀腺素fT₄較fT₃靈敏。對妊娠婦女或危重的非甲狀腺疾病如肝硬化、腎功能衰竭患者的甲狀腺功能判斷很有價值。尤其在中樞神經甲狀腺功能低下時，游離甲狀腺素fT₄含量測定更有價值。近年來已廣泛應用于臨床，其敏感性和特異性均明顯超過總甲狀腺素T₄(TT₄)。

長期以來，臨床一般采用酶免疫分析或放射免疫分析來檢測患者游離甲狀腺素fT₄的含量，但這兩種方法都有其缺點：如放免分析操作復雜，時間長，存在放射性污染問題；酶免疫分析靈敏度低，監測范圍窄。而化學發光免疫分析在酶免疫分析的基礎上結合了化學發光技術使得檢測靈敏度和檢測范圍得到提高。

發明內容

本發明的目的是提供一種游離甲狀腺素(fT₄)定量檢測試劑盒，其具有較高穩定性，靈敏度和準確性的優點。

本發明的另一目的是提供上述試劑盒進行檢測游離甲狀腺素(fT₄)的方法。

為實現上述發明目的，本發明的發明人在現有技術的基礎上進行了大量的研究和創造性的勞動，研制出了一種游離甲狀腺素(fT₄)定量檢測試劑盒，包括游離甲狀腺素(fT₄)標準品、辣根過氧化物酶(HRP)標記的游離甲狀腺素(fT₄)抗原、抗體、磁珠分離劑、發光底物液和洗液。

所述的抗體為羊抗甲狀腺素(T₄)的多抗。

所述的洗液含有0.05M磷酸鹽緩沖液PBS，1wt‰吐溫20和2wt‰硫柳汞。

一種利用所述的試劑盒檢測游離甲狀腺素(fT₄)的方法，包括下述步驟：

a.將實驗管按照校準品的濃度及標本編號，分別加入游離甲狀腺素(fT₄)標準品及待測標本100ul；

b.每管各加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的游離甲狀腺素(fT₄)抗原及抗體各100ul，充分混勻后37℃溫育1小時；

c.每管各加入100ul磁珠分離劑，靜置5分鐘，放在磁珠分離器上靜置5分鐘；

d.棄上清液，沉積物用洗液洗兩遍；

e.每管各加入發光底物液100ul；

f.在管式半自動/全自動化學發光儀上測量分析得到待測標本的游離甲狀腺素(fT₄)濃度。