[發(fā)明專利]乳清蛋白的活性凝膠電泳方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910076516.3
• 申請(qǐng)日: 2009-01-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101477079A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-07-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姜微波;林素菊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N27/447
• 分類號(hào): G01N27/447
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 王朋飛

1、一種乳清蛋白的活性凝膠電泳方法，包括樣品制備、活性凝膠電泳和數(shù)據(jù)處理分析，其特征在于，所述活性凝膠電泳的丙烯酰胺凝膠分離膠的濃度為8～12％，所有電泳材料中均不含有蛋白變性劑；具體電泳條件參數(shù)為：

電泳緩沖液：pH8.3的Tris-甘氨酸緩沖液；

上樣量：乳清蛋白：2倍活性蛋白樣品緩沖液＝1:3～5，7.5～12μL；

電壓：75～150V；

時(shí)間：25～75min；

溫度：2～4℃。

2、如權(quán)利要求1所述的乳清蛋白的活性凝膠電泳方法，其特征在于，乳清蛋白樣品與樣品緩沖液混合后直接進(jìn)行電泳分析，不需進(jìn)行加熱變性處理。

3、如權(quán)利要求1或2所述的活性凝膠電泳方法，其特征在于，所述活性凝膠電泳的丙烯酰胺凝膠濃縮膠的濃度為4～6％。

4、如權(quán)利要求1或3所述的活性凝膠電泳方法，其特征在于，所述活性凝膠電泳步驟還包括將凝膠進(jìn)行快速考馬斯亮藍(lán)R250染色，染色后再進(jìn)行快速脫色。

5、如權(quán)利要求1所述的活性凝膠電泳方法，其特征在于，所述樣品制備主要是指將乳品脫脂，分離酪蛋白，得到乳清蛋白。

6、如權(quán)利要求5所述的活性凝膠電泳方法，其特征在于，所述脫脂是將乳品在7500g～10000g下離心12～20min；所述分離酪蛋白是用酸調(diào)整乳品的pH至4.6，靜置12～20min后離心除去酪蛋白。

7、如權(quán)利要求6所述的活性凝膠電泳方法，其特征在于，所述酸為鹽酸、檸檬酸或乳酸中的一種或多種。

8、一種鑒定市售乳品的品質(zhì)的方法，其特征在于，取新鮮乳品和市售乳品，將新鮮乳品用與市售乳品相同的熱處理方式處理，將熱處理后新鮮乳品和市售乳品進(jìn)行樣品處理，然后進(jìn)行權(quán)利要求1所述的活性凝膠電泳，得到電泳圖譜，比較圖譜，鑒定市售乳品的品質(zhì)。

9、一種鑒定乳品的熱處理方式的方法，其特征在于，將待測(cè)乳品進(jìn)行樣品處理和活性凝膠電泳，根據(jù)經(jīng)不同熱處理方式的新鮮乳品的活性凝膠電泳標(biāo)準(zhǔn)圖譜，判定待測(cè)乳品的熱處理方式。