[發(fā)明專利]狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910073957.8
• 申請(qǐng)日: 2009-03-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101502651A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-08-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫思才;周凱
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西康寶生物制品股份有限公司
• 主分類號(hào): A61K39/40
• 分類號(hào): A61K39/40;A61K39/42;A61P31/04;A61P31/14
• 代理公司: 山西五維專利事務(wù)所（有限公司）
• 代理人: 李 毅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種生物免疫制品，特別是涉及一種能同時(shí)預(yù)防人狂犬病及破傷風(fēng)的雙效價(jià)免疫球蛋白及其制備方法。

背景技術(shù)

狂犬病是一種病原體為核糖核酸型的彈性病毒。世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，全球三分之二以上的國(guó)家和地區(qū)有狂犬病流行，我國(guó)及東南亞地區(qū)處于世界狂犬病高發(fā)區(qū)，其病例約占全球的70％以上。狂犬病一旦發(fā)病，目前尚無(wú)法醫(yī)治，死亡率幾乎達(dá)100％。根據(jù)WHO推薦的狂犬免疫接種方案，對(duì)暴露者注射人狂犬病免疫球蛋白(RIg)，然后肌肉注射狂犬病疫苗，以確保暴露者免疫效果。該方法被世界衛(wèi)生組織公認(rèn)為是目前唯一有效的預(yù)防方法。

破傷風(fēng)是一種嚴(yán)重威脅人類生命健康的急性特異性感染疾病，由破傷風(fēng)桿菌侵入人體傷口、生長(zhǎng)繁殖、產(chǎn)生毒素引起。破傷風(fēng)桿菌及其毒素不能侵入正常的皮膚和粘膜，故破傷風(fēng)都發(fā)生在傷后。一切開(kāi)放性損傷均有發(fā)生破傷風(fēng)的可能。人體破傷風(fēng)免疫球蛋白(TIg)是經(jīng)乙肝疫苗接種后再經(jīng)破傷風(fēng)類毒素(TD)免疫的具有高效價(jià)破傷風(fēng)抗體的血漿，經(jīng)低溫乙醇法分級(jí)沉淀、加壓過(guò)濾分離提純，并經(jīng)病毒滅活處理，用于防治破傷風(fēng)。

世界衛(wèi)生組織要求，在對(duì)病犬咬傷積極預(yù)防狂犬病的同時(shí)，也應(yīng)預(yù)防破傷風(fēng)。目前我國(guó)臨床使用的狂犬病人免疫球蛋白和破傷風(fēng)人免疫球蛋白均為單一效價(jià)，使用時(shí)需要多次注射，臨床使用不便，而且費(fèi)用高。制備一種即能預(yù)防狂犬病同時(shí)又能預(yù)防破傷風(fēng)發(fā)生的雙效價(jià)免疫球蛋白，將會(huì)有較大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)及產(chǎn)品效能的不足，提供一種即能預(yù)防狂犬病同時(shí)又能預(yù)防破傷風(fēng)發(fā)生的雙效價(jià)免疫球蛋白及制備方法。

本發(fā)明提供的狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白含有高效價(jià)的狂犬病抗體及破傷風(fēng)抗體，其免疫球蛋白純度不低于總蛋白含量的92％；狂犬病抗體效價(jià)不小于100IU/ml，破傷風(fēng)抗體效價(jià)不小于60IU/mL；蛋白質(zhì)含量不大于175g/L。

本發(fā)明提供的狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白僅與抗人的血清產(chǎn)生沉淀線，與抗馬、抗牛、抗豬、抗羊的血清均不產(chǎn)生沉淀線。

本發(fā)明提供的狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白與正常人血清比較，主要沉淀線應(yīng)為IgG，且其IgG單體及二聚體的含量之和不低于92％。

本發(fā)明將狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白制成常規(guī)的液體型或凍干劑型使用。

本發(fā)明的狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白的制備方法是將雙效價(jià)原料血漿經(jīng)常規(guī)的低溫乙醇蛋白分離法分級(jí)沉淀，提取免疫球蛋白組分，經(jīng)加壓過(guò)濾、離心、病毒滅活處理等必要的工序制成免疫球蛋白液體或凍干劑型。其制備方法的關(guān)鍵在于原料血漿的制備，具體方法是：

1)選擇身體健康，符合血液制品原料血漿規(guī)定要求的供血漿者接種狂犬病疫苗，至少15天后再應(yīng)用吸附破傷風(fēng)疫苗進(jìn)行免疫接種；

2)以固相酶聯(lián)免疫法(ELISA)定量檢測(cè)原料血漿的狂犬病抗體及破傷風(fēng)抗體，單一血漿的狂犬病抗體效價(jià)不低于6IU/mL，破傷風(fēng)抗體效價(jià)不低于5IU/mL，其它符合“血液制品原料血漿規(guī)程”要求，采集為狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白原料血漿；

3)混合采集的狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白原料血漿，混合后血漿的狂犬病抗體效價(jià)不低于10IU/mL，破傷風(fēng)抗體效價(jià)不低于8IU/mL。

本發(fā)明采集得到的原料血漿應(yīng)低溫冰凍儲(chǔ)存，其保存期不超過(guò)2年。作為制備狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白原料的混合原料血漿，每批次需由不少于100名供血漿者的原料血漿混合而成。

本發(fā)明的狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白可用于被狂犬或其他瘋動(dòng)物咬傷或抓傷暴露患者的免疫。其使用量以狂犬病抗體效價(jià)計(jì)，按20IU/kg體重計(jì)算，一次注射。如個(gè)體所需免疫球蛋白注射總劑量大于10mL時(shí)，可在1～2日內(nèi)分次注射。隨后即可進(jìn)行狂犬病疫苗的注射。

本發(fā)明提供的狂犬病、破傷風(fēng)雙效價(jià)人免疫球蛋白一次注射即可預(yù)防狂犬病和破傷風(fēng)，使用簡(jiǎn)單方便，具有較大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。本發(fā)明免疫球蛋白的原料血漿制備方法簡(jiǎn)單，免疫球蛋白制備成本低。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

1、供血漿者的免疫：

選擇身體健康，符合血液制品原料血漿規(guī)定要求的供血漿者，在0、3、7、14、28天分別接種狂犬病疫苗2、2、1、1、2劑。接種狂犬疫苗30天后，再應(yīng)用吸附破傷風(fēng)疫苗，接照0、14、28天劑量不小于0.5mL進(jìn)行免疫接種，并建立詳細(xì)的免疫記錄。

2、供血漿者的血漿篩選采集：