[發明專利]真菌源對甲氧基肉桂酸甲酯的制備方法

有效

• 申請號: 200910072308.6
• 申請日: 2009-06-17
• 公開（公告）號: CN101921812A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發明（設計）人: 宋瑞清;高海燕
• 申請（專利權）人: 東北林業大學;宋瑞清;高海燕
• 主分類號: C12P7/62
• 分類號: C12P7/62;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種對甲氧基肉桂酸甲酯的制備方法。

背景技術

甲氧基肉桂酸甲酯作為醫藥中間體主要用于化妝品中，作紫外防護吸收劑。經檢索目前尚未見到有關對甲氧基肉桂酸甲酯天然存在文獻報道，亦未見自生物中提取對甲氧基肉桂酸甲酯的報道。

發明內容

本發明的目的在于充分利用可再生的生物資源制備甲氧基肉桂酸甲酯，提供一種真菌源對甲氧基肉桂酸甲酯的制備方法。

為了達到上述目的，本發明采用的技術方案是：炭團菌菌絲體發酵液的制備——炭團菌菌絲體發酵液乙酸乙酯提取物的制備——含對甲氧基肉桂酸甲酯化合物的分離純化——對甲氧基肉桂酸甲酯的分離。

(1)炭團菌菌絲體發酵液的制備：

采用改良馬鈴薯葡萄糖液體培養基，對炭團菌菌絲體進行搖床發酵培養10天-15天，發酵培養條件為：溫度25℃-30℃，搖床轉數140r/min-160r/min，接種量0.5％-1.5％，裝液量40％-50％，馬鈴薯葡萄糖液體培養基配方為：馬鈴薯150-250g、葡萄糖17-22g、KH₂PO₄2.5-3.5g、MgSO₄1-2g、水1000ml，pH5-6，

(2)炭團菌菌絲體發酵液乙酸乙酯提取物的制備：

將培養10天-15天的炭團菌菌絲體發酵液用無菌紗布過濾后，與乙酸乙酯按重量體積比1∶3混合，常溫下靜止放置5天-10天，萃取后棄下層濾液，將上層有機溶劑以30℃真空旋轉蒸發除去溶劑得到固體樣品，

(3)含對甲氧基肉桂酸甲酯化合物的分離純化：

采用硅膠柱層析法，采用濕法裝柱，柱子直徑2cm、長40cm，硅膠為200-300目，洗脫劑為乙酸乙酯，石油醚＝1∶2，裝硅膠高度15cm-18cm，采用干法上樣，將炭團菌菌絲體發酵液乙酸乙酯提取物固體樣品用少量甲醇溶解后，加入少量硅膠，拌勻后水浴風干甲醇，將獲得的粉末小心加到柱子的頂層，用玻棒攪拌以除去氣泡，保持硅膠表面的平整，控制常壓自然流速，收取20-90分鐘內的餾分，經30℃真空旋轉蒸發獲得含對甲氧基肉桂酸甲酯化合物固體樣品，

(4)對甲氧基肉桂酸甲酯的分離：

采用高壓液相色譜法對上述含對甲氧基肉桂酸甲酯化合物進行分離。

本發明的優點是：

本發明的制備對甲氧基肉桂酸甲酯的原材料來源于可再生的生物資源，該發明具有原材料資源經濟、可再生、可持續利用。

附圖說明

圖1是含對甲氧基肉桂酸甲酯化合物的GC色譜峰；

圖2是對甲氧基肉桂酸甲酯的GC色譜圖及結構式。

具體實施方式

下面對本發明的實施例作進一步詳細描述。

實施例1、

采用改良馬鈴薯葡萄糖(PD)液體培養基配方為：馬鈴薯200g、葡萄糖20g、KH₂PO₄3g、MgSO₄1.5g、水1000ml，pH?5-6對炭團菌菌絲體進行搖床發酵培養10天，接種量0.5％，裝液量40％，發酵培養條件為：溫度25℃，搖床轉數140r/min，將培養10天的炭團菌菌絲體發酵液用無菌紗布過濾后，與乙酸乙酯按重量體積比1∶3混合，常溫下靜止放置5天，萃取后棄下層濾液，將上層有機溶劑以30℃真空旋轉蒸發除去溶劑得到固體樣品，采用硅膠柱層析法對上述固體樣品進行分離，采用濕法裝柱，柱子直徑2cm、長40cm，硅膠為200-300目，洗脫劑為乙酸乙酯，石油醚＝1∶2，裝硅膠高度15cm，采用干法上樣，將固體樣品用少量甲醇溶解后，加入少量硅膠，拌勻后水浴風干甲醇，將獲得的粉末加到硅膠柱子的頂層，用玻棒攪拌以除去氣泡，保持硅膠表面的平整，控制常壓自然流速，收取20-90分鐘內的餾分，經30℃真空旋轉蒸發獲得含對甲氧基肉桂酸甲酯化合物固體樣品，采用高壓液相色譜法對上述含對甲氧基肉桂酸甲酯化合物進行分離。

實施例2、