[發明專利]傳染性羊癢病抗性基因快速分型檢測試劑及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 200910070812.2
• 申請日: 2009-10-15
• 公開（公告）號: CN101671727A
• 公開（公告）日: 2010-03-17
• 發明（設計）人: 董志珍;李琳;肖妍;蔡國瑞;欒慎順;陳本龍
• 申請（專利權）人: 天津出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 天津才智專利商標代理有限公司
• 代理人: 王曉紅

技術領域

本發明屬于動物疾病檢測領域，尤其是一種以包含決定羊癢病抗性/敏感性的羊朊蛋 白編碼基因PRNP的第136、154和171位密碼子為靶目標設計的生物制劑，借助實時熒 光定量PCR(real-time?fluorescence?quantitative?PCR)檢測體系及其之后的終點讀板 模式，對PRNP的第136、154和171位密碼子進行檢測，用來判定被檢測羊是否含有傳 染性羊癢病抗性基因，即一種傳染性羊癢病抗性基因快速分型檢測試劑及其制備方法和 應用。

背景技術

羊癢病(scrapie)俗稱“瘙癢病”，屬于傳染性海綿狀腦病(Transmissible spongiform?encephalopathies，TSEs)的一種，是由羊癢病朊病毒引起成年綿羊和山羊 的一種慢性進行性的、致死性神經系統疾病(Stanley?B?Prusiner.The?Prion?Diseases. Scientific?American，1995，48-57)。瘙癢是癢病的一個顯著特征，也是其名字的來 源。此外，共濟失調、麻痹、衰弱、震顫、姿勢不穩、癡呆、知覺過敏、行為異常等神 經癥狀也是其主要的臨床癥狀，死亡率達100％。組織病理學病變局限于神經系統，以神 經元空泡化，灰質海綿狀病變，神經元喪失，神經膠質和星狀細胞增生，病原因子PrPsc 蓄積和淀粉樣蛋白斑塊形成為特征，病變通常為兩側對稱(Aguzzi?A，Heppner?FL. Pathogenesis?of?prion?diseases：a?progress?report.Cell?Death?and?Differentiation. 2000，7：889-902；Combrisson?H，Robasine?G，BRUGERE，etal.Urodynamic?parameters in?scrapie-afected?ewes?and?their?modifications?in?the?course?of?the?disease. Neurourology?and?rodynamics.1998，17：555-563)。

羊癢癢病迄今已有270多年的歷史記載，是最早所知的傳染性海綿狀腦病，多發于 綿羊和山羊，目前在世界許多地方流行。本病最早于18世紀發生于英格蘭，以后陸續傳 入比利時、法國、德國、西班牙、南非、印度、冰島、澳大利亞、新西蘭、加拿大和美 國。病原主要定位于中樞神經系統、脾臟和淋巴結中。不同品種、性別的綿羊和山羊均 可發病，但以美國薩福克種羊的敏感性較高。該病通常發生于病羊污染牧地中放牧的羊 群。以2～4歲的羊多發。可通過直接接觸和間接接觸感染。感染母羊的胎盤組織中含有 病原，因此也可通過胎盤垂直傳播。患病母羊和公羊的后代，其癢病的發病率較高。

本病除羊尸體消瘦和皮膚損傷外沒有肉眼可見的病變，其診斷主要依靠臨癥狀觀察 與病理組織學檢查進行確診。此外，本病還可通過病羊的肉骨粉等傳染給牛，而使牛感 染為瘋牛病。人食用了被瘋牛病病原污染的食品，可感染上傳染性海綿狀腦病——新變 異型克雅氏病(即nvCJD)。因此，羊癢病的診斷是根除和控制瘋牛病、克雅氏病的關鍵。