[發明專利]核桃青皮總單寧的制備及其在抗腫瘤藥物中的應用

無效

• 申請號: 200910070038.5
• 申請日: 2009-08-04
• 公開（公告）號: CN101618066A
• 公開（公告）日: 2010-01-06
• 發明（設計）人: 司傳領;朱振元;劉忠;劉鵬濤;惠嵐峰
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: A61K36/52
• 分類號: A61K36/52;A61P35/00;A61K131/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然藥物技術領域，具體涉及一種以核桃青皮為原料制備核桃青皮總單寧的方法及用途。

背景技術

惡性腫瘤是嚴重威脅人類健康的常見疾病，在我國城市人口中，腫瘤是第一位死因，占全部死亡率的1/4，腫瘤亦是當今醫學界的一大難題。在惡性腫瘤的三大療法中，藥物治療占有重要的地位，發展速度也最快，合成的化學類抑腫瘤藥物絕大多數是以天然抗癌活性成分為先導化合物，抗癌藥物的開發，包括計算機模擬和仿生設計都是以天然抗癌活性成分為基礎的。為了應對癌癥給人類健康所造成的巨大威脅，世界各國惡性腫瘤藥物開發科學工作者們尤為重視植物中具有抗腫瘤活性的天然產物。因此，從各種植物中篩選安全、高效、低毒的天然抗腫瘤活性成分單體或組分(分子群)成為近年來國內外科學家研究的重點課題。

胡桃屬(Juglans)植物為胡桃科(Juglandaceae)落葉喬木，其果實一般統稱核桃(或胡桃)。核桃青皮為核桃未成熟時包圍在核桃外部的一層厚厚的綠皮，隨著核桃逐漸成熟青果皮會逐漸變黑，最后自然脫落。核桃青皮的藥用歷史悠久，據《本草綱目》等祖國傳統醫學專著及當代國內外植物圖鑒記載，胡桃屬青皮辛、苦、澀、微寒，廣泛以其入藥用以抑制多種腫瘤生長、治療白血病、清熱、解毒、止痢、明目、消炎等，在德國和法國民間核桃青皮作為止痛藥、抗腫瘤藥物等。到目前為止，對核桃青皮抗腫瘤活性考察雖有零星報道，但對核桃青皮總單寧抗腫瘤活性成分的研究與開發尚屬空白。

發明內容

本發明的目的是提供一種自動化程度高、操作簡便、工藝規范、生產成本低、產率高的核桃青皮總單寧制備方法。

本發明的另一個目的是提供核桃青皮總單寧在制備抗腫瘤藥物中的應用。

本發明的技術方案概述如下：

本發明提出的核桃青皮總單寧的制備方法，包括如下步驟：

(1)以干燥、粉碎的核桃青皮為原料，按質量比為1∶1～1∶30加入體積百分濃度為1％～100％的乙醇水溶液，常溫或加熱提取，或利用常壓回流提取裝置提取，或微波或超聲波輔助提取1～5次，每次10min～96h，過濾，濾液減壓濃縮至原體積的1％～60％，得粗提物；

(2)加入粗提物質量1～10倍的水，攪拌，加入粗提物質量1～10倍的正己烷萃取1～10次，分離，向正己烷萃取剩余相加入粗提物質量1～10倍的二氯甲烷萃取1～10次，分離，向二氯甲烷萃取剩余相加入粗提物質量1～10倍的乙酸乙酯萃取1～10次，分離，得到乙酸乙酯萃取相和最后的水相；

(3)將乙酸乙酯萃取相減壓濃縮為原體積的10～80％，冷卻、離心、分離純化得到淺黃色沉淀即為核桃青皮總單寧。

優選的是：提取用乙醇水溶液的體積百分濃度為95％。

提取的次數最好為3次。

用本發明制備的核桃青皮總單寧的含量為70％～90％。核桃青皮總單寧含量為各類丹寧含量總和，其測定參照文獻(Makkar?H.P.S，et?al.，Bioresource?Technology，1993，45(1)：69～71)。經后續HPLC分離純化和MS、¹H及¹³C-NMR等現代波譜技術對化合物的結構解析、化合物理化性質等的檢測，本發明所制備的核桃青皮總單寧中含有大量的沒食子酸(gallicacid)、鞣花酸(ellagic?acid)、1，2，6-三沒食子酰葡萄糖(1，2，6-tri-O-galloyl-β-D-glucopyranoside)、1，3，6-三沒食子酰葡萄糖(1，3，6-tri-O-galloyl-β-D-glucopyranoside)、1，2，4，6-四沒食子酰葡萄糖(1，2，4，6-tetra-O-galloyl-β-D-glucopyranoside)、1，2，3，4，6-五沒食子酰葡萄糖(1，2，3，4，6-penta-O-galloyl-β-D-glucopyranoside)、2，3-O-4，4′，5，5′，6，6′-HHDP-(α/β)-D-葡萄糖(2，3-O-4，4′，5，5′，6，6′-HHDP-(α/β)-D-glucopyranoside)和長梗馬鈴素(pedunculagin)等單寧類化合物。

用本發明制備的核桃青皮總單寧顏色淺、純度高，制備方法具有得率高、生產成本低、工藝簡單規范的特點。

核桃青皮總單寧在制備抗腫瘤藥物中的應用。