[發明專利]一種禽用地衣芽孢桿菌制劑的制備

無效

• 申請號: 200910069937.3
• 申請日: 2009-07-30
• 公開（公告）號: CN101986865A
• 公開（公告）日: 2011-03-23
• 發明（設計）人: 王小娥
• 申請（專利權）人: 天津瑞普生物技術股份有限公司
• 主分類號: A23K1/18
• 分類號: A23K1/18;A61K35/74;A61P1/12
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于獸用生物制品領域，具體的說是提供一種作為飼料添加劑的地衣芽孢桿菌制劑的制備方法。

背景技術

微生態飼料添加劑是根據微生態學理論研制的含有對動物有益微生物的活菌制劑，它們通過維持動物腸道內微生態平衡而發揮作用，具有促進動物生長發育，提高動物機體免疫力等多種功能，且無污染、無殘留、無耐藥性和對環境無害等，是一類新型綠色環保飼料添加劑。這些禽畜用的益生菌制劑含有芽孢桿菌，乳酸桿菌，糞鏈球菌，雙歧桿菌，酵母等，光合細菌和梭狀芽胞桿菌屬的部分菌株及噬菌蛭弧菌等也偶然被用做益生菌添加到仔豬和仔雞飼料中。

活菌制劑始于上世紀初，有人用酸牛奶來調整幼畜腹瀉出現的腸道微生物菌群失調。后來，在研究中人們發現用活菌制劑可防止畜禽的腹瀉和腸炎，繼之又發現活菌制劑還可改善動物對飼料的利用，并有利于促進畜禽的生長發育和腸道健康，從而擴大了活菌制劑在畜牧生產中的作用和應用前景，概括起來，主要有以下幾個方面的作用：

改善動物胃腸道微生態環境：研究表明，動物自身及許多致病菌不會產生各種有毒物質，如胺、氨、細菌毒素、氧自由基等代謝產物。有些有益菌可以阻止毒性胺和氨的合成或把它們分解中和細菌毒素，從而避免這些有害物質對動物機體組織細胞的損害作用。一些好氧菌則通過產生超氧化物歧化酶來消除氧自由基，減少或消除氧自由基對細胞及細胞器膜質結構的損害。乳酸菌能夠產生有機酸和抗菌物質，降低腸道內pH值值和氧化還原電位，有利于宿主生長發育和維持腸道健康。

產生有益物質：動物微生態活菌制劑能夠在動物體內產生各種消化酶，合成B族維生素、維生素K等動物所必需的營養物質；同時能促使動物體增加對腸道內容物中鈣、鎂等營養物質的吸收。

建立和維持腸道微生態平衡：研究表明，動物腸道內寄居的微生物，主要為厭氧菌。通常情況下，腸道內有益菌和致病菌會保持一定比例，當條件發生改變時，致病菌大量繁殖引起平衡失調，從而導致動物體患病。當需氧型益生菌進入消化道后，生長繁殖消耗腸道內大量氧氣，通過“生物奪氧”使需氧型致病菌大幅度下降，因而起到防止動物患病的作用。研究還發現，益生菌能夠有秩序地定植于粘膜、皮膚等表面或細胞之間形成生物屏障，這些屏障可以阻止病原微生物的定植，起著占位、爭奪營養。互利共生或拮抗作用，形成保護屏障，阻止病原菌的侵入，從而對致病菌的定植產生抑制作用。增強動物免疫能力和促進動物生長：微生態制劑可作為非特異性免疫調節因子，增強吞噬細胞的吞噬能力和細胞產生抗體的能力，刺激動物產生干擾素，從而增強抗病能力。據報道，用活菌微生態制劑——益生素飼喂哺乳仔豬，添加組腹瀉率明顯比對照組減少(3.91％，P＜0.01)，成活率提高79％。在10～28日齡的仔豬飼料中添加益生素，試驗組采食量平均比對照組增加70g/d，增重提高4.2％。又有研究報道，在雛雞中分別飼喂和不飼喂乳酸桿菌制劑兩個組的基礎上，進行雞的白痢沙門氏菌攻毒試驗。結果表明，飼喂乳酸桿菌雛雞組與對照組相比，死亡率明顯降低了20％。還有報道稱在魚蝦飼料中添加微生態制劑，可使魚蝦增重提高10％～20％。

在畜牧生產中常用的微生態添加劑，乳酸菌和芽胞桿菌類益生菌為主要的微生態添加劑。與乳酸菌、雙歧桿菌等相比，芽孢桿菌的優點在于它對外界不良環境有很強的抵抗力，能耐60℃以上高溫，保存時間長(常溫下1年以上)，培養容易，便于加工制成各種制劑，效果穩定。本試驗采用牛肉湯蛋白胨培養基為培養一級種子，用營養肉湯培養基培養二級種子，用牛肉湯蛋白胨培養基進行連續補料分批發酵方式擴增培養，發酵液經過離心，菌體用輕質碳酸鈣吸附在干燥箱中40℃烘干成干粉，再與藥用葡萄糖和白色淀維粉稀釋制備成微生態制劑。

發明內容

本發明的目的是提供一種能促進畜禽類生長，防治細菌性腹瀉及菌群失調的地衣芽孢桿菌制劑的制備方法。

本發明的技術方案概述如下：

(1)用牛肉湯蛋白胨培養基為種子培養基，pH值6.0～8.0，30～37℃有氧條件下培養地衣芽孢桿菌18～24h，成為一級種子；

(2)將一級種子液接種在營養肉湯培養基中培養，pH值6.0～8.0，30～37℃有氧條件下培養18～24h，成為二級種子；

(3)將二級種子液接種在牛肉湯蛋白胨培養基中發酵培養，pH值6.0～8.0，30～37℃有氧條件下，采用連續補料分批發酵方式培養48～72h，培養結束后靜置24～48h使芽孢出芽率達到90％以上；

(4)發酵液經常溫8000rpm?20min離心，菌體沉淀用輕質碳酸鈣吸附，在干燥箱中40℃烘干成干粉；