[發明專利]提高氧化葡糖桿菌產2-酮-L-古龍酸的方法有效
| 申請號: | 200910069697.7 | 申請日: | 2009-07-10 |
| 公開(公告)號: | CN101603060A | 公開(公告)日: | 2009-12-16 |
| 發明(設計)人: | 元英進;儀宏;王麗麗;周劍;馬倩;薛佳 | 申請(專利權)人: | 天津大學 |
| 主分類號: | C12P7/60 | 分類號: | C12P7/60;C12R1/01 |
| 代理公司: | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 | 代理人: | 陸 藝 |
| 地址: | 300072*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 提高 氧化 葡糖 桿菌 古龍酸 方法 | ||
1.提高氧化葡糖桿菌產2-酮-L-古龍酸的方法,其特征是包括如下步驟:
(1)種子培養:
稱取:L-山梨糖10-50g,玉米漿2-10g,牛肉膏2-10g,酵母浸粉2-10g,尿素0.5-5g,蛋白胨2-10g,KH2PO40.5-5g,MgSO40.1-0.7g,CaCO30.5-5g,加水至1L,調pH為6.5~7.0,121℃滅菌20min,制成種子培養基;
將斜面的氧化葡糖桿菌(Gluconobacter?oxydans)CGMCC?NO.1.110接種于所述種子培養基中,28-35℃,160-250r/min搖床振蕩,培養24-48小時,制成種子培養液;
(2)發酵:
稱取:L-山梨糖40-120g,玉米漿10-50g,尿素10-25g,KH2PO40.5-3g,MgSO40.2-1.2g,CaCO31-10g加水至1L,調pH為6.5~7.5,121℃滅菌20min,制成發酵培養基;
將所述種子培養液以體積比為5%-15%的比例,接入所述發酵培養基中,28-35℃,160-250r/min搖床振蕩,發酵培養48~96小時,在所述發酵培養0小時至36小時之間的任意時刻,加入巰基化合物,使巰基終濃度為0.1-30mM。
2.根據權利要求1所述的提高氧化葡糖桿菌產2-酮-L-古龍酸的方法,其特征是所述巰基化合物為還原型谷胱甘肽,二硫蘇糖醇,半胱氨酸或輔酶A。
3.根據權利要求1所述的提高氧化葡糖桿菌產2-酮-L-古龍酸的方法,其特征是所述步驟(1)為:稱取:L-山梨糖20g,玉米漿3g,牛肉膏3g,酵母浸粉3g,尿素1g,蛋白胨10g,KH2PO41g,MgSO40.2g,CaCO31g加水至1L,調pH為6.8,121℃滅菌20min,制成種子培養基;
將斜面的氧化葡糖桿菌(Gluconobacter?oxydans)CGMCC?NO.1.110接種于所述種子培養基中,30℃,220r/min搖床振蕩,培養36小時,制成種子培養液。
4.根據權利要求1所述的提高氧化葡糖桿菌產2-酮-L-古龍酸的方法,其特征是所述步驟(2)為:稱取:L-山梨糖80g,玉米漿20g,尿素12g,KH2PO41g,MgSO40.5g,CaCO35g加水至1L,調pH為7.0,121℃滅菌20min,制成發酵培養基;
將所述種子培養液以體積比為10%的比例,接入所述發酵培養基中,30℃,220r/min搖床振蕩,發酵培養72小時,在所述發酵培養0小時至36小時之間的任意時刻,加入巰基化合物,使巰基終濃度為3mM。
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