[發明專利]活體仔豬心臟缺血再灌注模型及模型的建立方法

無效

• 申請號: 200910069495.2
• 申請日: 2009-06-30
• 公開（公告）號: CN101601374A
• 公開（公告）日: 2009-12-16
• 發明（設計）人: 郭亮;趙偉
• 申請（專利權）人: 天津農學院
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027;A61D1/00;A61D7/00
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司
• 代理人: 肖莉麗

技術領域

本發明涉及一種活體仔豬心臟缺血再灌注模型及模型的建立方法。

背景技術

動物器官的利用為近半個世紀以來研究的熱點，取得令人振奮的成果。而在動物的器官再利用過程中會經歷缺血再灌注損傷(ischemiareperfusion?injury，IRI)。缺血再灌注損傷是指組織器官缺血后再灌注，不僅不能使組織器官功能恢復，反而加重組織器官的功能障礙和結構損傷。缺血再灌注損傷在許多重要器官包括心、肝、肺、腎、胃腸道等均可發生。如果對動物器官進行移植，那么移植器官經缺血損傷后，隨著血流的開放，又會經歷第二次打擊。會使器官的損傷進一步加劇。

心臟是一個耗氧量高而儲備能力很低的器官。心臟在缺血幾秒鐘后就耗盡自身的氧而使有氧代謝轉變為無氧代謝。缺血時間長將發生心肌細胞的變性和壞死。而缺血心肌迅速恢復灌注使心肌損傷進一步加重。在移植過程中器官會經受缺血再灌注損傷的影響，這對手術的成功與否起著重要的作用。所以如何評價在手術前后器官組織的損傷情況是一個重要的問題。

目前在我國，豬的主要價值還是體現在肉用價值上，而對豬器官的功能性開發的研究，特別是活體仔豬心肌缺血再灌注研究實驗很少報道。

發明內容

本發明是為了克服現有技術中的不足之處，提供一種以活體仔豬為對象，動物品種普遍，成本較低廉，操作方便的心臟缺血再灌注模型及模型的建立方法。

本發明通過下述技術方案實現：

一種活體仔豬心臟缺血再灌注模型，其特征在于，將活體仔豬開胸手術，進行心臟冠狀動脈左旋支結扎，之后再放開結扎線，得到活體仔豬心臟缺血再灌注模型。

一種活體仔豬心臟缺血再灌注模型的建立方法，其特征在于，包括下述步驟：

(1)手術前的飼養管理：仔豬采用實驗動物國際標準的規定進行飼養。

(2)手術前預處理：選擇體溫正常、精神狀態良好、無異常表現的健康活體仔豬作為實驗動物，仔豬麻醉前禁食12h。

(3)麻醉：按照每千克體重肌肉注射乙酰丙嗪0.5mg、阿托品0.04mg、846麻醉合劑0.03mL進行基礎麻醉，10min后按照每千克體重肌肉注射舒泰50麻醉劑2mg進行麻醉。肌肉注射可以選擇臀部或背部肌肉。

(4)固定：待活體仔豬麻醉后，右側臥位保定在手術臺上；將仔豬進行氣管插管，接呼吸機進行機械通氣；使用呼吸機內自動吸入氣體內濃度為2％的異氟烷穩定10min，檢測心臟和呼吸頻率，測量肛門溫度；

(5)開胸：將麻醉后心臟和呼吸正常、肛溫正常的仔豬用碘酒在左胸部皮膚表面進行消毒，用刮毛器清除豬毛，用手術刀在第3、4肋間切開皮膚，在心跳搏動處分離肋間肌肉，并用撐開器打開胸腔，暴露心包和肺，縱形切開心包；

(6)結扎：切開心包后找到左心耳，分離左心耳耳下脂肪，分離回旋支動脈，用結扎線結扎冠狀動脈左旋支；

(7)縫合：結扎一定時間后，打開結扎線，之后縫合心包，逐層縫合肋骨、肌肉，縫合外部皮膚，用紗布對手術部位進行包扎，得到仔豬心臟缺血再灌注模型。

(8)手術后處理：手術后待仔豬自主呼吸穩定后拔出氣管插管，及時送回實驗動物觀察室。仔豬安置在寬敞的動物消化代謝籠內，室內溫度22～25℃，相對濕度65～68％，清潔衛生。分別2次肌肉注射氨芐西林納，每次注射藥量為0.5mg，兩次間隔4小時。按標準方法進行飼養。

本發明具有下述技術效果：

豬在解剖、生理、營養和新陳代謝等方面與人類非常相似，豬的心血管系統、消化系統、皮膚、營養需要、骨骼發育以及礦物質代謝等都與人的情況極其相似。本發明成功構建的活體仔豬心臟缺血再灌注模型，提供了一種新型的可供醫學實驗的動物種類，即實驗豬模型，成為研究人類疾病的重要動物模型，并且是現在所研究的人造器官的主要供體。由于可供實驗選擇的豬品種，其資源廣泛，數量群體大，動物原料成本適宜。建立的仔豬活體開胸冠狀動脈結扎心臟缺血手術方法，為今后大量獲取豬心臟相關試驗數據，提供了可行性，而且，操作方便。確定的活體豬心臟手術相關的血像影響指標，具有臨床醫學研究參考價值。

具體實施方式

以下結合具體實施例對本發明進行詳細說明。

1.手術前的仔豬飼養

仔豬采用實驗動物國際標準的規定進行飼養。

選擇保育期長白和大約克夏品種活體仔豬作為實驗對象，具體飼養方法如下：

1.1實驗仔豬的飼養環境