技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥材檢測技術(shù)領(lǐng)域，涉及中藥藥品、保健品的質(zhì)量檢測，特別是運用 超高效液相色譜-四級桿-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用對西洋參與人參及其制劑進(jìn)行快速鑒別及定 量測定的方法。

背景技術(shù)

西洋參(Panax?quinque?folium?L.)和人參(Panax?ginseng?C.A.Mey)同 屬五加科植物。西洋參主產(chǎn)于北美洲，具有補氣養(yǎng)陰，清熱生津等功效。我國東北地區(qū) 也有引種，俗稱為種洋參。人參屬多年生草本植物，主產(chǎn)于我國東北地區(qū)，具有大補元 氣，復(fù)脈固脫，補脾益肺，生津安神，開心益智等功效。二者主要成分均為人參皂苷類 化合物，但藥效和價格相差較大。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為，西洋參味甘、微苦，性涼，人參 味甘、微苦，性平。西洋參具有提高免疫力，增強體質(zhì)的功效，可直接服用或制成各種 制品，如膠囊、含片、茶包、沖劑和口服液等產(chǎn)品，可作為日常保健品，市場需求量大。 目前全國生產(chǎn)西洋參含片的生產(chǎn)企業(yè)就有近萬家。但由于進(jìn)口西洋參成本高，且產(chǎn)量有 限，遠(yuǎn)不能滿足生產(chǎn)需求，加之國內(nèi)人參價格相對低廉，且成分口感相近，不易區(qū)別， 導(dǎo)致西洋參市場以次充好、假冒偽劣商品普遍存在，嚴(yán)重?fù)p害消費者利益。而國內(nèi)外藥 典現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)都不能對西洋參人參制劑進(jìn)行有效鑒別。亟待建立快速、有效的西洋參或人 參及其制劑鑒別測定方法。

已有研究成果表明，西洋參和人參所含成分的種類相近，但各有其特征成分。西洋 參的含特征成分?jǐn)M人參皂苷F11，人參中僅含百萬分之一；而人參中所含特征成分人參皂 苷Rf，西洋參中不存在。但擬人參皂苷F11和人參皂苷Rf屬同分異構(gòu)體，極性非常相似， 分子量相同，一般難以分離，導(dǎo)致區(qū)分困難。已有的分析方法樣品處理復(fù)雜，檢測時間 一般在60min以上，且分離效果不佳，不利于定量檢測及快速篩選。

現(xiàn)行的2005版《中國藥典》對西洋參藥材的鑒別采用了薄層鑒別法，使用西洋參對 照藥材、擬人參皂苷F11對照品、人參皂苷Rb1對照品、人參皂苷Re對照品、及人參皂 苷Rg1對照品為對照，其中擬人參皂苷F11是西洋參區(qū)別于人參的特征成分，但是該成 分與人參中所含人參皂苷Rf是同分異構(gòu)體，用薄層層析難以區(qū)分，所以單用此法不足以 鑒別西洋參。標(biāo)準(zhǔn)中含量測定項下也僅對人參皂苷Rg1、人參皂苷Re以及人參皂苷Rb1 采用高效液相色譜法在檢測波長203nm下進(jìn)行了測定，仍未涉及西洋參的特征成分。且 供試品溶液的制備方法復(fù)雜，需用水飽和的正丁醇加熱回流1.5小時，放冷，補重后， 蒸干，再用50％甲醇復(fù)溶，轉(zhuǎn)移，再稀釋定容。經(jīng)C18柱分離，以乙腈-0.1％磷酸溶液為 流動相，梯度洗脫后，203nm波長下測定吸收度，單液相檢測時間就需100min以上，方 法復(fù)雜耗時，且專屬性不強，仍然難以對西洋參進(jìn)行鑒別檢測。目前對擬人參皂苷F11 和人參皂苷Rf的快速分離測定方法尚未見報道。

超高效液相色譜相比普通液相色譜，具有分析速度快，分離能力強，重復(fù)性好，樣 品量小等特點，適合與對難分離組分進(jìn)行快速分離。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)同時實現(xiàn)了 對沸點高、極性強、熱不穩(wěn)定化合物液相分離和定性定量檢測，靈敏度高、檢出限低、 能夠提供化合物結(jié)構(gòu)信息和含量信息，達(dá)到對樣品同時進(jìn)行定性定量的目的，增強了選 擇性，縮短分析時間。四級桿-飛行時間質(zhì)譜的結(jié)合，更能夠鎖定目標(biāo)離子，進(jìn)行二級質(zhì) 譜的解析，并具有高分辨率，提供高精確度的分子量。目前，液相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜聯(lián)用 已發(fā)展成為一種重要的分析技術(shù)，在食品生物、環(huán)境化學(xué)、生物化學(xué)等許多領(lǐng)域的應(yīng)用 已逐漸展開。其分析條件的關(guān)鍵在于流動相的選擇以及質(zhì)譜條件的優(yōu)化，如碰撞能量、 氮氣流速和源溫等。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于建立一種快速有效的鑒別檢測方法，即對西洋參制劑的質(zhì)量真?zhèn)? 進(jìn)行快速測評，提供了一種樣品處理方法簡便、縮短分析時間和低檢測限的同時檢測西 洋參和人參中擬人參皂苷F11和人參皂苷Rf的方法，并依據(jù)已有實驗考察數(shù)據(jù)，可以測 算西洋參制劑中人參摻雜的含量，是一種對西洋參產(chǎn)品進(jìn)行快速評估考察的方法，同時 適用于所有含西洋參及人參的各種劑型產(chǎn)品檢測。為完成上述目的，本發(fā)明是公開如下 的技術(shù)方案：

一種利用超高效液相色譜-四級桿-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用快速檢測西洋參人參及其制劑 質(zhì)量真?zhèn)蔚姆椒?，主要包括樣品處理、液相分離，質(zhì)譜檢測三個方面，其下步驟如下：