[發(fā)明專利]苯磺酰氟類化合物及其制備方法和應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910069307.6
• 申請日: 2009-06-18
• 公開（公告）號: CN101585787A
• 公開（公告）日: 2009-11-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李壽椿
• 申請（專利權(quán)）人: 李壽椿
• 主分類號: C07C309/87
• 分類號: C07C309/87;C07C309/86;C07C303/02;C07K1/13;G01N33/50
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司
• 代理人: 王小靜

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及到一種苯磺酰氟類化合物及其制備方法和應(yīng)用，具體為以磺酰氟基(-SO₂F)作為反應(yīng)基團(tuán)，以母體苯環(huán)作為發(fā)色團(tuán)、以R作為輔助取代基團(tuán)的新型苯磺酰氟類化合物(A?New?Kind?of?Benzene?Sulfonyl?Fluoride)及其在氨基酸和蛋白質(zhì)、肽以及含有一級氨基或二級氨基、羥基、酚羥基、巰基的化合物或其它化學(xué)物質(zhì)中的應(yīng)用。苯磺酰氟類化合物作為衍生化試劑及標(biāo)記試劑不僅可以用于蛋白質(zhì)、肽結(jié)構(gòu)及氨基酸的測定、進(jìn)行蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)組學(xué)研究，還可以用于新藥的研究開發(fā)，亦可用作醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)診斷疑難病癥、藥效評估，也可作為國家藥檢單位、質(zhì)檢單位進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控的標(biāo)記試劑。

背景技術(shù)：

目前在蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)組學(xué)研究領(lǐng)域所應(yīng)用的標(biāo)記試劑中，不少產(chǎn)品的衍生化反應(yīng)溫度都在60℃-70℃左右，較低溫度也在55℃左右，因此在衍生化反應(yīng)過程中將使蛋白質(zhì)、肽的立體構(gòu)型發(fā)生變化，導(dǎo)致蛋白質(zhì)、肽失去生物活性，從而難以測定蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)。具體還表現(xiàn)在：

1)某些標(biāo)記試劑對于組成人體蛋白質(zhì)的某些氨基酸不能完全適用，例如，對二級氨基酸、色氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸。

2)某些標(biāo)記試劑在與α-氨基酸的手性中心的官能團(tuán)反應(yīng)后，會產(chǎn)生內(nèi)消旋化作用，導(dǎo)致部分或全部立體化學(xué)信息丟失。在肽中會導(dǎo)致手性中心部分或全部差向異構(gòu)化失去生物活性。

3)大多數(shù)現(xiàn)有標(biāo)記試劑對空氣中的濕度比較敏感，釋放出腐蝕性氣體，易于水解，從而失去其衍生化的反應(yīng)活性。

4)某些標(biāo)記試劑與氨基酸反應(yīng)所生成的衍生化產(chǎn)物穩(wěn)定性低，影響后續(xù)檢測操作的正常進(jìn)行，嚴(yán)重者甚至?xí)?dǎo)致錯誤的檢測結(jié)果。

5)某些標(biāo)記試劑由于檢測靈敏度不夠，無法檢測出超微量的已知或未知化合物。

6)某些標(biāo)記試劑由于合成工序繁復(fù)，導(dǎo)致售價昂貴，無法普及使用。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的在于提供一種新型的苯磺酰氟類化合物及其制備方法和應(yīng)用，以克服已有技術(shù)的不足。本發(fā)明的分子中含有在可見光區(qū)或是在近紫外光區(qū)可以進(jìn)行檢測的結(jié)構(gòu)，并且具有可以與蛋白質(zhì)、肽、氨基酸及含有一級氨基、二級氨基、羥基、酚羥基、巰基的化合物或化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行衍生化反應(yīng)的活性基團(tuán)。具有在接近人體體溫(35℃-45℃左右、pH8-10左右)條件下進(jìn)行衍生化反應(yīng)、不產(chǎn)生消旋化作用、產(chǎn)品本身及衍生化產(chǎn)物穩(wěn)定性高、儀器響應(yīng)值高、不釋放腐蝕性氣體、無放射性、無環(huán)境污染、合成方便、制造成本較低、易于在室溫下保存及運輸?shù)牡奶攸c。

本發(fā)明提供的苯磺酰氟類化合物，具有通式為(I)的化合物：

其中，R為烷基、烷氧基、酰基、羧酸基、氰基、硝基、鹵素或是它們的混合。

本發(fā)明具有通式為(I)的化合物中可選擇的取代基：

R＝4-乙基、4-叔丁基、4-鹵素、2-甲氧基、4-甲氧基、4-乙酰基、3-氰基、2-硝基、3-硝基、3-羧酸基；

R＝2，4-二甲基、3，5-二甲基、2-甲基-5-硝基、4-甲基-3-硝基、2-甲氧基-4-甲基、2-甲基-4-甲氧基、2，5-二甲氧基、3，4-二甲氧基、4-氟-3-硝基、2-氟-5-硝基、2-氟-4-甲基。

R＝2，4，6-三甲基；

本發(fā)明提供的苯磺酰氟類化合物的制備方法包括的步驟：在相轉(zhuǎn)移催化劑聚乙二醇400-800存在下，以本發(fā)明的前體化合物苯磺酰氯和金屬氟化物為原料，在有機溶劑中(以乙腈為溶劑，或二氧陸圜為溶劑)，至少室溫條件攪拌下，進(jìn)行氟代反應(yīng)1-2小時，過濾，用乙醇洗滌除去溶劑，干燥。

本發(fā)明提供的苯磺酰氟類化合物應(yīng)用于蛋白質(zhì)、肽或氨基酸的衍生化反應(yīng)及其檢測；或與含有一級氨基、二級氨基、羥基、酚羥基、巰基的化合物或其它化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行衍生化反應(yīng)及其檢測。

本發(fā)明提供的苯磺酰氟類化合物是具有全新分子結(jié)構(gòu)的標(biāo)記試劑，它具有較低的分子量，分子量范圍在178-239.6道爾頓之間，屬于小分子化合物。較小的分子使得苯磺酰氟類化合物更易于向蛋白質(zhì)、肽分子的二級或三級結(jié)構(gòu)內(nèi)滲透，進(jìn)行衍生化反應(yīng)，達(dá)到微量、超微量定性定量分析目的，即在溫和條件(35℃-45℃左右、pH8-10左右)下能夠與蛋白質(zhì)、肽、氨基酸及含有一級氨基或二級氨基、羥基、酚羥基、巰基的化合物或化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行衍生化反應(yīng)。其衍生化產(chǎn)物穩(wěn)定，重復(fù)性好，儀器響應(yīng)值高，檢測靈敏度達(dá)到nmol-fmol級，使超微量的已知或未知化合物達(dá)到化學(xué)衍生化和儀器檢測的效果。