[發明專利]利用蛋白質組學技術分析TEL/AML1陽性兒童ALL預后的方法及用途

無效

• 申請號: 200910067783.4
• 申請日: 2009-01-23
• 公開（公告）號: CN101788555A
• 公開（公告）日: 2010-07-28
• 發明（設計）人: 竺曉凡;陳玉梅;鄒堯;郭曄;陳曉娟;張麗;范寶麗;胡瑩
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院血液學研究所
• 主分類號: G01N33/48
• 分類號: G01N33/48
• 代理公司: 天津才智專利商標代理有限公司 12108
• 代理人: 王曉紅

技術領域

本發明涉及一種蛋白質組學技術的應用，具體地說，涉及一種利用蛋白質組學技術分析TEL/AML1陽性兒童ALL預后的方法及用途。

背景技術

蛋白質組學(proteomics)是直接以生命功能的執行者蛋白質為切入點，在整體水平上研究蛋白質的組成與調控的活動規律，該技術為解碼具有潛在抗腫瘤活性的藥物靶位以及惡性腫瘤早期診斷和預后的分子標志等展現了良好的前景。主要采取的方法是比較蛋白質組學中常用的雙向凝膠電泳、圖像分析、生物質譜和生物信息學方法的研究技術。

急性淋巴細胞白血病占兒童急性白血病的75-85％，是嚴重危害兒童健康，導致兒童死亡的主要疾病之一，由于各種治療措施的不斷進步，包括聯合化療的應用、支持治療手段的改善以及庇護白血病的預防性治療等，兒童急性淋巴細胞白血病的5年無病生存率可達80％左右。目前兒童急性淋巴細胞白血病的預后因素很多，如性別、人種、基因多態性、年齡、發病時白細胞數、早期治療反應、微小殘留病以及化療藥物敏感性等，而TEL/AML1是由12p13的TEL(ETV6)和21q22的AML1(RUNX1)基因融合而成，其在B系兒童急性淋巴細胞白血病中的發生率約20-25％，發病年齡多在2～4歲左右，總體評價臨床預后較佳，但仍有部分患兒在治療過程中會出現早期復發，影響其總體生存率；目前臨床上常用的流式細胞術及PCR等方法仍無法細致分型，從而早期診斷，減少治療毒性，提高療效；是增加整個群體的治療強度，還是尋求新的個體化治療的分子生物學指標，成為我們新的問題和有待解決的不足。

發明內容

TEL/AML1陽性兒童急性淋巴細胞白血病在臨床特征及預后上存在異質性，為了解決在治療此亞型兒童急性淋巴細胞白血中，無法合理有效的進行個體化治療，以提高治療效果，減輕治療相關毒性的不足，本發明利用蛋白質組學技術首先構建了TEL/AML1陽性兒童急性淋巴細胞白血病系的蛋白表達譜，進而分組進行功能蛋白的比較，以發現差異性蛋白，結合此亞型兒童急性淋巴細胞白血病的臨床特征，提出新的治療靶點和個體化治療的分子生物學監測指標。本發明提供了一種將蛋白質組學研究方法應用于TEL/AML1陽性兒童急性淋巴細胞白血病群體基礎和臨床研究中的技術方案。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：一種利用蛋白質組學技術分析TEL/AML1陽性兒童ALL預后的方法，包括以下步驟：

(1)利用蛋白質組學技術首先構建了TEL/AML1陽性兒童急性淋巴細胞白血病系的蛋白表達譜；

(2)分組進行功能蛋白的比較，發現差異性蛋白；

(3)結合此亞型兒童急性淋巴細胞白血病的臨床特征，提出新的治療靶點和個體化治療的分子生物學監測指標。

所述蛋白質組學技術為雙向凝膠電泳技術、圖像分析、生物質譜和生物信息學方法。

蛋白質組學技術在TEL/AML1陽性兒童ALL預后分析中的應用。

本發明的有益效果是：本發明所提供的技術方案達到更加精確的對兒童急性淋巴細胞白血病進行分組比較的效果，建立兒童急性淋巴細胞性白血病的蛋白質表達譜，從蛋白質水平提出了兒童急性淋巴細胞性白血病的個體化治療的監測指標，并提供了可能的治療靶標。

具體實施方式

選取兒童初診急性淋巴細胞白血病患者，通過FISH或/和PCR方法證實融合基因為TEL/AML1陽性，以CAMS-ALL2005方案進行治療(地塞米松(8mg/m²)預治療一周，觀察一周時外周血幼稚細胞數，以及VDLP方案誘導緩解治療兩周時患兒骨髓的幼稚細胞數)，根據治療反應、臨床預后進行分組，不同組別之間臨床預后存在顯著差異，早期復發患兒但在療程6月時復發，復發時FISH方法檢測TEL/AML1仍為陽性，高白細胞組(＞100×10⁹/L)及標危組觀察兩年仍為完全緩解狀態，融和基因檢測為陰性。