[發(fā)明專利]以幼子房為外植體的君子蘭離體快速繁殖方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910067435.7
• 申請日: 2009-08-21
• 公開（公告）號: CN101637127A
• 公開（公告）日: 2010-02-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王麗;王欽美
• 申請（專利權(quán)）人: 東北師范大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 長春市東師專利事務(wù)所
• 代理人: 劉延軍;趙 軍

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物繁殖方法，具體涉及是花卉的無性快速繁殖方法。

背景技術(shù)

植物組織培養(yǎng)即植物無菌培養(yǎng)技術(shù)，是根據(jù)植物細胞的全能性，利用植物體離體的器官(如根、莖、葉、莖尖、花、果實等)、組織(如形成層、表皮、皮層、胚乳等)或細胞(如大孢子、小孢子、體細胞等)以及原生質(zhì)體，在無菌和適宜的人工培養(yǎng)基及光照、溫度等人工條件下，能誘導(dǎo)出愈傷組織、不定芽、不定根，形成完整的植株或產(chǎn)生具有經(jīng)濟價值的其它產(chǎn)品的技術(shù)。由植物組織培養(yǎng)所產(chǎn)生的再生植株除了極低的變異外基本都能保持親本(外植體來源植株)的優(yōu)良性狀。植物組織培養(yǎng)技術(shù)發(fā)明以來已經(jīng)取得了很大的進展，自上世紀60年代以來植物組織培養(yǎng)已經(jīng)從實驗室研究階段成為一種大規(guī)模成批量的工廠化生產(chǎn)方法。君子蘭，是石蒜科君子蘭屬的多年生草本觀賞植株。原產(chǎn)南非高山，性喜溫涼，于本世紀初經(jīng)由德國和日本引入我國，并安家落戶。是我國名貴花卉，經(jīng)濟價值較高。它株型端莊、葉、花、果并美，深受國內(nèi)外花卉愛好者的青睞。目前，君子蘭的繁殖方式主要為種子繁殖與分株繁殖，而這兩種方式的繁殖速度都很慢：君子蘭一年只開一次花，且種子需要9個月才能成熟；分株繁殖一年最多分出1-3株。由于君子蘭高度雜合，種子繁殖得到珍品君子蘭的得率很低，即便以珍品君子蘭做父母本得到珍品的幾率仍很低，珍品君子蘭在國內(nèi)國際市場一直供不應(yīng)求。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)離體快速繁殖君子蘭可以大規(guī)模產(chǎn)生株型統(tǒng)一的君子蘭，快速繁殖君子蘭優(yōu)良稀缺品種，進一步滿足國內(nèi)國際市場的需求。前人所做的君子蘭組織培養(yǎng)實驗雖然已經(jīng)初步獲得成功，但分化最好的品種平均每塊外植體上只能分化出少于2.5株苗，繁殖系數(shù)極低。這就限制了君子蘭組織培養(yǎng)技術(shù)在實際生產(chǎn)中的應(yīng)用。而本發(fā)明可使君子蘭在一年以內(nèi)實現(xiàn)快速繁殖。一塊外植體可再生出100多株再生植株，非常適合工廠化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

為克服君子蘭傳統(tǒng)繁殖方法產(chǎn)生君子蘭個體株型千差萬別、繁殖速度慢的缺點；也為了克服前人君子蘭組織培養(yǎng)實驗中再生系數(shù)小的缺點。本發(fā)明使君子蘭在相對短的時間內(nèi)大量產(chǎn)生基因背景完全相同、株型統(tǒng)一的再生植株。以大花君子蘭幼花序(青苞)的子房縱切塊為外植體，脫分化率可達80％以上，分化率可達70％。由一塊外植體誘導(dǎo)的愈傷組織經(jīng)反復(fù)繼代可分化出100多株叢生芽。叢生芽生根率可達100％，在適宜環(huán)境下移栽成活率達100％。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

1.外植體接種及愈傷組織誘導(dǎo)：取大花君子蘭幼花序，放入無菌超凈臺中，用75％(體積/體積)酒精浸泡30-60秒，用0.1-0.2％(質(zhì)量/體積)的升汞溶液浸泡3-10分鐘，無菌水沖洗3-6遍。將幼花序子房切下，從中部縱切兩刀，接種在含6-BA1.0mg/L、NAA1.0mg/L、2，4-D1.0mg/L、蔗糖3.0-3.5％(質(zhì)量/體積)的MS培養(yǎng)基上，置于20℃-28℃散射光下培養(yǎng)。30-50天繼代一次，待長出黃色較致密愈傷時便可誘導(dǎo)分化。

2.不定芽的誘導(dǎo)：將黃色的愈傷轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基：MS+6-BA(0.5-1.0mg/L)+NAA(0.5-4mg/L)+3.0-3.5％蔗糖，30-50天繼代一次，20℃-28℃每天40W日光燈光照8-10小時。該愈傷分化能力可持續(xù)一年以上，從一塊愈傷經(jīng)反復(fù)繼代可分化出100多株再生苗。

3.根的誘導(dǎo)：再生植株轉(zhuǎn)到1/2MS+NAA(0.2-0.5mg/L)+蔗糖2％的生根培養(yǎng)基上，20℃-28℃全天光照，60天左右繼代一次。

4.再生植株移栽：植株生根后即可移栽。腐殖土121℃滅菌30-60分鐘。移栽前將植株上的瓊脂等雜物沖洗干凈。7-15天澆一次透水便可成活。

本發(fā)明的有益效果是：使君子蘭在相對短的時間內(nèi)大規(guī)模繁殖出遺傳背景相同、外觀整齊的植株，植株移栽后生長狀態(tài)良好，平均單株再生苗的成本低；適合于君子蘭優(yōu)良稀缺品種的快速繁殖。

具體實施方式

下面將結(jié)合實際操作對本發(fā)明作進一步的說明，但是本發(fā)明的內(nèi)容不僅限于以下3個實施例。

實施例1：

1.外植體接種及愈傷組織誘導(dǎo)：取大花君子蘭幼花序，放入無菌超凈臺中，用75％(體積/體積)酒精浸泡30秒，用0.1％(質(zhì)量/體積)的升汞溶液浸泡3分鐘，無菌水沖洗3遍。將幼花序子房切下，從中部縱切兩刀，接種在含6-BA1.0mg/L、NAA1.0mg/L、2，4-D1.0mg/L、蔗糖3.5％(質(zhì)量/體積)的MS培養(yǎng)基上，20℃散射光下培養(yǎng)，30天繼代一次，待長出黃色較致密愈傷時便可誘導(dǎo)分化。